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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】SDS-PAGE蛋白电泳 样品中盐浓度和pH值对条带有影响？
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE蛋白电泳 样品中盐浓度和pH值对条带有影响？ 已有7人参与

各位
这几天一直跑电泳，情况不大好，条带很粗还有偏移。我的样品中盐离子浓度蛮高的，各个样品的pH值有些差别，不知道这对条带有没有影响？要怎么处理呢？谢谢！！
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1楼 2010-10-15 12:38:22
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1):鼓励交流。 2010-10-15 14:35:05
本帖内容被屏蔽
2楼2010-10-15 13:13:53
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gdxinlan at 2010-10-15 13:13:53:
pH只要不极端就可；
盐浓度影响较大，要脱盐的

因为蛋白浓度不高 我就是怕透析什么的蛋白就更少了
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3楼2010-10-15 22:03:05
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xmasylm

铜虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+1):谢谢分享。 2010-10-16 04:57:28
盐浓度对电泳影响很大
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4楼2010-10-16 00:25:14
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by xmasylm at 2010-10-16 00:25:14:
盐浓度对电泳影响很大

因为蛋白浓度不高 我就是怕透析什么的蛋白就更少了 还有别的方法吗
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5楼2010-10-16 21:05:31
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gdxinlan

禁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
本帖内容被屏蔽
6楼2010-10-16 21:29:40
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2009227004

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励回答 2010-10-17 00:12:00
可以稀释一下再跑看看，如果还是不行的话，说明影响很大，只能透析，或者浓缩也可以。。。我有试过盐析完后稀释跑电泳，条带就会比较清晰！！！！
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当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。
7楼2010-10-17 00:11:24
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gdxinlan at 2010-10-16 21:29:40:



透析+浓缩

好 我试试 那一般有蛋白含量在多少跑出来效果比较好呢 谢谢
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8楼2010-10-17 15:20:49
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kevinding

至尊木虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 2009227004 at 2010-10-17 00:11:24:
可以稀释一下再跑看看，如果还是不行的话，说明影响很大，只能透析，或者浓缩也可以。。。我有试过盐析完后稀释跑电泳，条带就会比较清晰！！！！

好 我试试 那你跑的时候一般有蛋白含量在多少跑出来效果比较好呢 谢谢
赞一下 回复此楼
9楼2010-10-17 15:21:30
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2009227004

金虫 (正式写手)
★ ★
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dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-10-17 19:01:29
这个具体没算过了，反正盐析后沉淀一般是用3-4倍的体积溶解，然后再稀释个2-3倍就可以跑得还不错，具体的情况你可以自己摸索一下！！！
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当别人都在假装正经的时候，我就假装不正经。
10楼2010-10-17 17:03:43
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