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tjshengwu

新虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】提质粒用:大肠杆菌培养 已有4人参与

配制LB培养基300ml:1.5g酵母提取物,3.0g蛋白胨,3.0g氯化钠
1ml、 200ul、10ul枪头,5个18*180mm试管(10ml/管),1个1000ml的三角瓶(培养基250ml)

高温高压灭菌,121度  15min
超净工作台上,照紫外25min。开照明,风机
每个试管中加入Amp10ul,三角瓶中加入250ulAmp,放入4度保存一天
每个试管中接入大肠杆菌10ul,放入摇床上培养:37度,180转,
培养5个小时,菌液为透明,几乎没长,补加100ul菌量,2个小时后菌液透明
将三个试管中的菌全部接入三角瓶中过夜培养
菌落长起来,培养基为浑浊
发酵结束后,打开棉塞,有种厕所的味道
提质粒,电泳结果:质粒亮度不够
经检验,质粒试剂盒没问题,现在头疼不知道该怎么办?
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violet.zhou

木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
菌摇的太久了
2楼2010-10-13 12:17:49
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j2

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没调PH
放4度后,接种菌前培养基预温一下
修炼ing,当虫仙……
3楼2010-10-13 13:19:30
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futian0212

新虫 (初入文坛)

4楼2016-02-05 07:08:24
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8023xz

铁杆木虫 (文坛精英)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
培养基的量是多少?

发自小木虫Android客户端
5楼2016-02-06 00:34:24
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