| 查看: 1914 | 回复: 6 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
brightjoe至尊木虫 (职业作家)
|
[交流]
【求助/交流】克隆测序问题 已有1人参与
|
||
| 最近做基因表达，挑克隆测序在引物的位置（酶切位点附近）总是少一个核苷酸。实验重复了好几遍，自己怀疑是引物不纯，换了家公司合成引物还是出现同样的问题。引物采用的是page纯化，难道纯度不够吗？或者是载体有问题，还是感受态菌复制系统出了问题，想不明白？望达人不吝赐教。实验重复了五六遍了。。。。诶 |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有295人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 克隆过程出现的问题
已经有7人回复
- 克隆测序的问题
已经有3人回复
- pcr产物测序问题
已经有10人回复
- DGGE胶回收问题
已经有13人回复
- 测序的问题
已经有24人回复
- DEEG条带测序问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】请教有关DNA测序问题，请高手不吝赐教，万分感激
已经有10人回复
- 【求助/交流】克隆测序无信号
已经有14人回复
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
3楼2010-10-12 12:45:24
jasco
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 17 (小学生)
- 金币: 1626.1
- 红花: 3
- 帖子: 991
- 在线: 82小时
- 虫号: 287776
- 注册: 2006-10-21
- 专业: 生物化学
2楼2010-10-12 12:41:08
brightjoe
至尊木虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 35648.8
- 散金: 34
- 帖子: 3523
- 在线: 310.6小时
- 虫号: 601097
- 注册: 2008-09-12
- 专业: 微生物遗传育种学
4楼2010-10-12 12:58:46
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
brightjoe(金币+10):谢谢赐教，谢谢赐教！确实是缺失不同的碱基，不过同一个样品还没有测过两次，那测序图谱是好的能说明测序结果没问题吗？ 2010-10-12 15:07:10
|
你说的“缺失在引物上”是在插入片段的引物上么？ 如果是的话，和载体没什么关系吧 用同一个克隆测多个反应，结果里面缺失的位置相同么？如果相同，说明确实存在这样一个缺失，可能确实是引物的问题；如果不同，则可能是测序的问题，比如这里的序列比较特殊，或者连接位点附近，载体序列和片段序列恰好形成某种结构，导致测序酶在这里发生slip，或者测序信号在这里发生压缩错位，这都有可能的，尤其是在每次缺失的位置都不一样，无法得到一个稳定结果的情况下。 |
5楼2010-10-12 13:55:54
28