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xiaoyan08

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[交流] 【求助/交流】Western 条带拖尾，有图，望大家帮忙找原因已有5人参与

是72kd的一个蛋白，是脾酪氨酸激酶（SYK）。我跑的是8%的分离胶，以前也跑过12%的胶，均拖尾拖得很严重，大家帮忙找找原因。
8%分离胶

12%分离胶

这是对比度调过之后

[ Last edited by xiaoyan08 on 2010-9-29 at 10:22 ]

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1楼 2010-09-29 10:19:41

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maoyz0127

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xiaoyan08(金币+3):谢谢 2010-09-30 09:04:21

蛋白降解也是有可能的，降解后不同分子量的蛋白相互聚合，更容易沉淀

4楼2010-09-30 08:39:15

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查看全部 17 个回答

maoyz0127

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★
xiaoyan08(金币+3): 2010-09-29 10:43:34
1949stone(金币+1):maybe 2010-09-29 10:52:41

上样时有沉淀吧或者配的胶有问题比如丙烯酰胺配稀了或者pH不准

赞一下(1人)

2楼2010-09-29 10:27:31

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xiaoyan08

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我同意第一个可能性

★
amisking(金币+1):鼓励交流！ 2010-09-29 19:14:39

引用回帖:

Originally posted by maoyz0127 at 2010-09-29 10:27:31:
上样时有沉淀吧或者配的胶有问题比如丙烯酰胺配稀了或者pH不准

我查的也说是溶解不均，可是我们老板非说是蛋白降解了，蛋白降解应该是变成小分子，而不是向大分子方向拖尾吧。
那我把样品离心下，取上清做一下。

赞一下(1人)

3楼2010-09-29 10:45:33

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降解？

引用回帖:

Originally posted by maoyz0127 at 2010-09-30 08:39:15:
蛋白降解也是有可能的，降解后不同分子量的蛋白相互聚合，更容易沉淀

为什么只是在大分子方向有拖尾呢，难道只是聚合成大分子？看来以后上样离心取上清是比较谨慎的做法

5楼2010-09-30 09:06:03

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