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银虫 (初入文坛)

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[交流] 【求助/交流】如何进行大肠杆菌中 beta-半乳糖苷酶的活性测定已有3人参与

我现在正准备做大肠杆菌中 beta-半乳糖苷酶的活性测定
请问有那些方法

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1楼 2010-09-19 16:43:21

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Mckenzie9076

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

2楼: Originally posted by gbrillia at 2010-09-19 16:50:06
如果是测定菌体内的beta活性，首先要将细胞破碎得到酶液，取250微升酶液加入500微升ONPG，37度反应15min，加入500微升10%碳酸钠终止反应，测量OD420吸光值即可。可以根据标准曲线调整上面的反应体系

过去那么久了也不知道您还在不在，请问这是测定本底半乳糖苷酶活性的方法吗？我不转任何质粒测定本底酶活，一直不出现黄色。是我的方法错误了吗

发自小木虫IOS客户端