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知足

银虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】如何进行大肠杆菌中 beta-半乳糖苷酶的活性测定 已有3人参与

我现在正准备做大肠杆菌中 beta-半乳糖苷酶的活性测定
请问有那些方法
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gbrillia

银虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+3):鼓励应助 2010-09-19 17:07:30
如果是测定菌体内的beta活性,首先要将细胞破碎得到酶液,取250微升酶液加入500微升ONPG,37度反应15min,加入500微升10%碳酸钠终止反应,测量OD420吸光值即可。可以根据标准曲线调整上面的反应体系
2楼2010-09-19 16:50:06
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知足

银虫 (初入文坛)

谢谢啊,不过我在书上看的说加2-3滴甲苯,那种方法更好一些
3楼2010-09-19 16:59:49
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Mckenzie9076

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by gbrillia at 2010-09-19 16:50:06
如果是测定菌体内的beta活性,首先要将细胞破碎得到酶液,取250微升酶液加入500微升ONPG,37度反应15min,加入500微升10%碳酸钠终止反应,测量OD420吸光值即可。可以根据标准曲线调整上面的反应体系

过去那么久了也不知道您还在不在,请问这是测定本底半乳糖苷酶活性的方法吗?我不转任何质粒测定本底酶活,一直不出现黄色。是我的方法错误了吗

发自小木虫IOS客户端
4楼2018-05-14 15:17:28
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