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tutufei

铜虫 (小有名气)

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[交流] 【求助/交流】组氨酸标签会影响酶活吗？

现象：目的蛋白加了His-tag后，发现酶活降低了
请问有必要切除标签吗？

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1楼 2010-09-11 21:35:40

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米菲的旋律

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scelab(金币+5):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-11 23:03:48
tutufei(金币+3):谢谢 2010-09-15 17:40:57

额，我看的文献不算少了，还没见过切组氨酸标签的，GST倒是要切。
his-tag就是为了方便纯化，又因为对结构影响不大，所以一般不需要切除。

对酶活有影响，证明组氨酸标签在酶活性中心附近？

不管怎样，如果说你做的是应用方面研究，应该重视这个问题，如果做的偏向理论研究，那就忽略掉吧~~

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物必先腐而后虫生

2楼2010-09-11 22:06:14

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dianaofyezi

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amisking(金币+2):鼓励一下！ 2010-09-12 09:17:14
tutufei(金币+2):谢谢 2010-09-15 17:41:08

his之所以用的广泛如2楼所说是因为纯化，也有见过his影响蛋白结构的，但是毕竟是少数的个例。不知道你说对酶活的影响，如果确实是因为his的原因，可以考虑更换带有hisi的载体，有些载体是N和C端都有his的，有些事N或者C端的。你尝试下更换了酶活还会降低么，如果结果不同了，那么你就可以考虑2楼说的his处于酶活位点附近，可以夺研究研究了。

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52187644

3楼2010-09-12 00:23:40

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