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tutufei

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】组氨酸标签会影响酶活吗?

现象:目的蛋白加了His-tag后,发现酶活降低了
请问有必要切除标签吗?
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米菲的旋律

木虫 (著名写手)

Always Keep The Faith!

★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+5):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-09-11 23:03:48
tutufei(金币+3):谢谢 2010-09-15 17:40:57
额,我看的文献不算少了,还没见过切组氨酸标签的,GST倒是要切。
his-tag就是为了方便纯化,又因为对结构影响不大,所以一般不需要切除。

对酶活有影响,证明组氨酸标签在酶活性中心附近?

不管怎样,如果说你做的是应用方面研究,应该重视这个问题,如果做的偏向理论研究,那就忽略掉吧~~
物必先腐而后虫生
2楼2010-09-11 22:06:14
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★
amisking(金币+2):鼓励一下! 2010-09-12 09:17:14
tutufei(金币+2):谢谢 2010-09-15 17:41:08
his之所以用的广泛如2楼所说是因为纯化,也有见过his影响蛋白结构的,但是毕竟是少数的个例。不知道你说对酶活的影响,如果确实是因为his的原因,可以考虑更换带有hisi的载体,有些载体是N和C端都有his的,有些事N或者C端的。你尝试下更换了酶活还会降低么,如果结果不同了,那么你就可以考虑2楼说的his处于酶活位点附近,可以夺研究研究了。
52187644
3楼2010-09-12 00:23:40
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