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[交流]
【求助/交流】引物设计加碱基修饰问题
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| 我在设计一对引物，在给定的序列两头分别设计上下游引物，以扩增全部序列。由于选择的范围小，只能通过改变引物长度来选择引物。而所有的引物都不是很符合要求。请问我可不可以在原来的基础上在5'端加两个碱基修饰，提高引物的退火温度和引发效率？？这两个碱基是可以随便加的吗？随便加ATGC都可以，还是经过blast后找到这条序列的上游碱基，加的碱基与序列的上游碱基一致？很迷茫，望各位大侠指教！感激不尽！ |
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