24小时热门版块排行榜    

查看: 698  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

adslye

银虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】为什么用RT-PCR等实验方法获得的mRNA往往缺少完整的5’端?

为什么用RT-PCR等实验方法获得的mRNA往往缺少完整的5’端?

谢谢~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sqhnsd

金虫 (正式写手)


看天(金币+1):鼓励回答 2010-08-20 20:29:37
adslye(金币+5):多谢,大概明白了。 2010-08-21 13:28:05
引用回帖:
Originally posted by adslye at 2010-08-20 14:01:57:
为什么用RT-PCR等实验方法获得的mRNA往往缺少完整的5’端?

谢谢~~

分情况,一般用RT-PCR都是用oligo dT作为引物,进行反转录,如果你的mRNA比较长,或者有比较复杂的结构,那很难合成到mRNA 5'短,中间可能就有酶脱落的问题。
当然,如果你基因比较短或者结构比较简单,酶-模板-引物复合物就可以顺利通过到达5‘端。
3楼2010-08-20 15:58:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

空谷幽风

金虫 (正式写手)


看天(金币+1):鼓励交流 2010-08-20 20:29:45
凡是做pcr,片段的两端都容易缺失碱基,这是很正常的事情
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
2楼2010-08-20 15:11:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

snzydong

铁杆木虫 (著名写手)


看天(金币+1):鼓励回答 2010-08-20 20:30:02
问题也不大,看你下游做什么实验,要是基因克隆就多提几次就好了,要是所实时定量那就没有问题
4楼2010-08-20 16:31:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 16/800 2026-08-11 08:18 by wmfsnow
[基金申请] 帮忙看看fileCode +5 wwncly 2026-08-10 9/450 2026-08-11 08:10 by li9527
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +4 Tide man 2026-08-10 4/200 2026-08-11 07:45 by emeraldine
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +4 瞬息宇宙 2026-08-10 4/200 2026-08-11 02:02 by 旁观2020
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见