| 查看: 974 | 回复: 2 | |||
[交流]
【求助/交流】酶解法做根尖染色体鉴定必须用Giemsa 染色液染色吗？已有2人参与
|
|
酶解法做根尖染色体鉴定必须用Giemsa 染色液染色吗？ Giemsa 染色液比较难的配制 那我直接用改良品红来染色 可以不呢？ 染了色还需要盖盖玻片不呢? 希望好心人指点一二哦！！！ 实验步骤： 根尖染色体观察 (1)材料的准备：选择生长旺盛的植株，然后将根尖用剪刀去掉老根，放在清水中，可以适当加些肥料如尿素等，但注意不能过量，经常换水，待根尖长到1厘米时，选择生长粗壮的根尖剪下，用0.002％的8-羟基喹啉预处理2～3小时(处理时温度不要太高，最好保持在25℃以下)，再把根尖转移到Carnoy's溶液中固定1～24小时，如果能马上进行处理更好，如果不能则保存在70％的酒精中，4℃保存备用。 (2)根尖的处理：取出保存的根尖，用水充分冲洗，在37℃温度下酶解 (2.5％的纤维素酶和1.0％的果胶酶)2～2.5小时，用针尖压根尖，应有“软”的感觉，不软则染色体不易分散开，太软则染色体容易丢失，具体的时间依照根尖的生长情况而定。 (3)涂片：酶解完成后，用水充分冲洗根尖，取少量的分生区在洁净的载玻片上进行涂片(一个根尖可以做几个涂片)，注意不能太多，否则会造成细胞重叠。为了分散良好，用乙酸和甲醛按照1∶3的比例配制新鲜的混合液，取一滴滴在材料上，细胞会自然铺展开来，效果不错。之后立即用火焰干燥或者自然干燥，二者的区别不大。 (4)染色：改良品红染色。？？？ (5)观察和照相：预先在普通的光学显微镜上进行初步筛选，选取分散良好染色适度的片子在激光共聚焦显微镜上观察并照相。 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有279人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
重组质粒酶切的电泳图
已经有6人回复- 这个世界真是乱了，有的要求老板必须有第一作者，有的最烦老板有第一作者，你们是评
已经有12人回复
- 求助诸位！！单从真菌的菌落形态可以鉴定到哪一层面，纲？目？科？
已经有12人回复
- 双酶切看不到小片段，为什么？
已经有19人回复
- 求助一种只能给水染色而不能进入油相的染色剂...急急急急急急急
已经有8人回复
- 银染色聚丙烯酰胺凝胶电泳
已经有13人回复
- 染色后细胞失色怎么翻译？
已经有1人回复
- 测酶活中的缓冲液怎么配制
已经有11人回复
- Help！酶活性突然变低，找不到原因！
已经有10人回复
- 酶切后未纯化连接出现的问题
已经有18人回复
- 咨询：推荐酶标仪品牌，希望能给出优缺点
已经有11人回复
- 求助高手，镜检（革兰氏染色），阳性肠球菌总是出现假阴性
已经有4人回复
- Gimsa染色做核型分析，为什么细胞质的颜色染的很蓝，而细胞核或染色体根本看不见呢？
已经有10人回复
2楼2010-07-29 19:20:02
lixg
铁杆木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 61 (初中生)
- 金币: 7627.1
- 散金: 1
- 红花: 7
- 帖子: 591
- 在线: 106.4小时
- 虫号: 859417
- 注册: 2009-09-29
- 专业: 发育生物学
3楼2010-07-30 08:00:30