应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】4% 多聚甲醛作为固定液的具体使用方法
81/1返回列表
查看: 5499  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】4% 多聚甲醛作为固定液的具体使用方法 已有5人参与

24孔板中放入爬片后，加入细胞悬液，药物或者荧光物质处理；
24小时后，吸掉培养液，用PBS洗一遍！
然后就用4% 多聚甲醛固定吗？
还是先将小片取出放到载玻片上，然后再用4% 多聚甲醛固定？
我是要做爬片（一定要放到载玻片上的）用荧光显微镜观察FITC。
有这方面经验的多多指教！非常感谢。

同时拿我上次做实验的过程给大家看看
上次实验非常失败，白忙活了两天
小片放入24孔板，细胞常规传代操作，每孔接种细胞2万个
加入药物及荧光物质等处理细胞（特殊处理，在细胞悬液状态下处理的细胞）
24小时后细胞贴壁，吸掉培养液，PBS洗了3遍
取出小片入到载玻片就观察了。
没有使用4% 多聚甲醛固定液
取出小片到载玻片前用PBS洗了三遍，每遍只用了几秒时间
结果观察发现本底荧光较强，细胞数量比开始观察到的贴壁量明显减少
结果明显不能反应问题
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-26 17:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黄大牛

铜虫 (初入文坛)
??ing
回复此楼
朝为田舍郎，暮登天子堂。将相本无种，男儿当自强。
2楼2010-07-26 19:10:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wufengjian

木虫 (正式写手)
蜗牛VS蜗牛(金币+10):谢谢，给的晚了。 2010-10-13 13:44:54
不用放到载玻片上固定，在孔板中直接加入4%多聚甲醛。静置15min，用PBS洗2遍就Ok了。
赞一下 回复此楼
3楼2010-07-26 20:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wufengjian at 2010-07-26 20:35:54:
不用放到载玻片上固定，在孔板中直接加入4%多聚甲醛。静置15min，用PBS洗2遍就Ok了。

它的作用就是防止细胞被轻易的洗掉对吗？
赞一下 回复此楼
4楼2010-07-27 09:00:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜗牛VS蜗牛

捐助贵宾 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by wufengjian at 2010-07-26 20:35:54:
不用放到载玻片上固定，在孔板中直接加入4%多聚甲醛。静置15min，用PBS洗2遍就Ok了。

http://wenku.baidu.com/view/6223644ac850ad02de804187.html
这里面是说把爬片取出后再固定的。
赞一下 回复此楼
5楼2010-07-28 14:20:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wufengjian

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):感谢交流~ 2010-10-14 08:33:49
其实取不取出来应该都可以，取出来只不过多了一步操作。不取出来也不影响它的固定作用。我一般都是固定好染色完毕后最后在封片的前一步将盖玻片取出。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-10-13 23:05:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我本兽医

铁虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
4%多聚甲醛，固定细胞，直接在24孔板里加就可以了
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2010-10-14 09:29:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cuijiaoyan

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
细胞里加多少多聚甲醛呢？
赞一下 回复此楼
一辈子没有多长，一定要活的有意义。
8楼2013-05-07 21:49:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜗牛VS蜗牛 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085600 材料与化工 329分求调剂 +8 Mr. Z 2026-03-25 8/400 2026-03-25 23:00 by peike
[考研] 一志愿河工大 081700 276求调剂 +3 地球绕着太阳转 2026-03-23 3/150 2026-03-25 19:10 by 雾散后相遇lc
[考研] 材料与化工304求B区调剂 +3 邱gl 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:03 by Ainin_
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 0854电子信息求调剂 324 +4 Promise-jyl 2026-03-23 4/200 2026-03-25 11:36 by Sugarlight
[考研] 085600材料与化工调剂 +9 A-哆啦Z梦 2026-03-23 15/750 2026-03-25 11:18 by Ainin_
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 求调剂 +6 研研，接电话 2026-03-24 7/350 2026-03-24 17:01 by barlinike
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
[考研] 一志愿华东理工大学081700，初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 303求调剂 +5 安忆灵 2026-03-22 6/300 2026-03-22 12:46 by 素颜倾城1988
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ^O^乜 2026-03-19 7/350 2026-03-20 21:43 by JourneyLucky
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭