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【求助/交流】4% 多聚甲醛作为固定液的具体使用方法 已有5人参与
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24孔板中放入爬片后，加入细胞悬液，药物或者荧光物质处理； 24小时后，吸掉培养液，用PBS洗一遍！ 然后就用4% 多聚甲醛固定吗？ 还是先将小片取出放到载玻片上，然后再用4% 多聚甲醛固定？ 我是要做爬片（一定要放到载玻片上的）用荧光显微镜观察FITC。 有这方面经验的多多指教！非常感谢。 同时拿我上次做实验的过程给大家看看 上次实验非常失败，白忙活了两天 小片放入24孔板，细胞常规传代操作，每孔接种细胞2万个 加入药物及荧光物质等处理细胞（特殊处理，在细胞悬液状态下处理的细胞） 24小时后细胞贴壁，吸掉培养液，PBS洗了3遍 取出小片入到载玻片就观察了。 没有使用4% 多聚甲醛固定液 取出小片到载玻片前用PBS洗了三遍，每遍只用了几秒时间 结果观察发现本底荧光较强，细胞数量比开始观察到的贴壁量明显减少 结果明显不能反应问题 |
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cuijiaoyan
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8楼2013-05-07 21:49:38