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【求助/交流】连T载体后，转化不成功！请各位同仁帮忙分析下！有图有数据 已有15人参与
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我的目的片段1800左右，连了5次T，转化后，板上没有菌落！ 昨天和一个师姐又做了一次转化，今早还是没长，但是她的板长啦！ 我的目的回收条带，如图！我只切了很亮的部分，下面拖尾的部分没切！  回收后，测了DNA含量！ A260/A280=1.91, 含量31.7ng/微升 用的是TAKARA公司的PMD18-T试剂盒 我用了三个连接体系是： 一个是：solution I: 5微升，片段：4微升 ，T载体：1 微升 算出来的T载体摩尔数与插入片段载体摩尔数约是：1：3 一个是：solution I: 5微升，片段：5微升 ，T载体：1 微升 算出来的T载体摩尔数与插入片段载体摩尔数约是：1：4 一个是：solution I: 5微升，片段：5微升 ，T载体：1 微升 算出来的T载体摩尔数与插入片段载体摩尔数约是：1：5 连接时间是：16个小时左右 另外感受态是当天做的！ 不存在问题！ 请各位帮我分析下，哪里出了问题！ [ Last edited by ltakashi on 2010-7-24 at 09:37 ] |
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