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【求助/交流】18s克隆文库相关问题
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[交流]
【求助/交流】18s克隆文库相关问题
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刚接触这个行业不久,最近需要构建一个18srDNA克隆文库,参考了一些文献资料,但还是有些问题没理解,特来请教:
1. 如何选择质粒? 是不是只要pcr产物长度适合该质粒就可以,比如PMD18-T(产物长约1700bp)
2. 如何去除重复的阳性克隆子?参考很多意见,貌似大家都认为菌落PCR不是很靠谱,所以应该会选用酶切的方法。问题又来了,应该如何选择内切酶呢?是应该选择能切开模板的内切酶然后根据酶切谱型来判断么?
其实还有好多问题..有没有高手能指导下,或者介绍下相关的文献学习下,不胜感激!
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