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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 植物克隆,表达相关的几个问题
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perfectyw

金虫 (小有名气)

[求助] 植物克隆,表达相关的几个问题

请问各位牛人们,我目前研究植物转基因,我刚入门,请问:
1.植物基因的载体,质粒,都有哪些?
2.是选择双元载体,将目的基因转进去后,直接农杆菌表达好了, 还是先转到克隆载体里,再转到表达载体好?能推荐一些常用的,而且流行的吗?
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1楼 2011-05-29 14:25:11
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zhangtao0502

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-05-29 20:09:31
perfectyw(金币+1): 谢谢啦～～不知道虫友这有木有pBI121 2011-05-30 09:06:08
仅回答一下你第二个问题
首先你得确定你的目的片段，是从别的载体上切下来用还是通过PCR扩出来，前者那应该是序列确定的了，可以直接连双元载体，后者应该先测序，确定序列后再转双元载体，所以应该先连测序载体了。
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2楼2011-05-29 18:58:06
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lihuaannie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
perfectyw(金币+1): 恩，明白了，谢谢啊，测序载体有哪些？直接用cDNA测序不行么？ 2011-05-31 22:16:53
silicare(金币+3): 鼓励新虫发帖交流，欢迎常来生物综合版 2011-06-07 18:45:09
植物的载体运用的有很多，像pCAMBIA系列的是现在比较通用的。
做表达载体，首先你的确定你的目的片段正确才行，所以同意楼上的观点，先在测序载体里面做，然后再转到双元表达载体，这个载体构建好后，最好也测序验证一下。
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3楼2011-05-31 13:59:41
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dream-fish

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
silicare(金币+3, EPI+1): 鼓励发帖交流，欢迎常来生物综合版 2011-06-07 18:45:29
perfectyw(金币+1): 谢谢啊～请问ocs可以作为终止子吗？ 2011-06-07 23:33:04
载体嘛，pCAMBIA系列的很好用，还有就是Gateway系列的载体，只要你实验室有用该系统。还有常用的什么T载体的很实用。
一般来说，克隆到一个基因之后最好装到T载体，因为你可能后面需要构一系列的载体，在转植物之前一定要认真测序，因为植物的生长周期比较长，如果移码，你就伤不起啊
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4楼2011-06-07 16:41:45
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perfectyw

金虫 (小有名气)
5楼2011-07-10 16:11:51
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perfectyw

金虫 (小有名气)
是的。不错
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6楼2011-11-21 10:55:15
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