24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 840  |  回复: 6

虫虫6527

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】筛选转化子 已有5人参与

我转化基因到TOP10,长出来的单菌落做PCR有时候没有带,但是提出质粒P就有带,不知道是什么原因,哪位指教一下,谢谢~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-15 18:20:43
直接提质粒酶切鉴定呗

PCR验证不保险,万一污染了什么的,结果不好解释

酶切是群体性质,比较保险
2楼2010-07-15 18:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫虫6527

银虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-07-15 18:08:36:
直接提质粒酶切鉴定呗

PCR验证不保险,万一污染了什么的,结果不好解释

酶切是群体性质,比较保险

验证转化子直接用酶切成本有点高吧,验一次用半管酶
3楼2010-07-15 19:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流! 2010-07-15 22:20:19
引用回帖:
Originally posted by 虫虫6527 at 2010-07-15 19:40:16:

验证转化子直接用酶切成本有点高吧,验一次用半管酶

怎么会用那么多。。。。。。。。
Takara的Eco RI那么一大管子,得用多久啊。。。。。。
挑菌也挑不了多少啊,顶多二三十个克隆吧
4楼2010-07-15 20:42:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+2):谢谢分享 2010-07-16 10:59:01
引用回帖:
Originally posted by 虫虫6527 at 2010-07-15 19:40:16:

验证转化子直接用酶切成本有点高吧,验一次用半管酶

酶切10微升体系只要加0.3微升酶就够了,枪头蘸一下的量就可以了。再说按照经验,要是一个板子上挑了十个都没有一个对的基本就可以重做了。一般我挑4到6个,没一个对的我就重做了
5楼2010-07-16 10:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zijing5322

铁虫 (小有名气)

PCR不准 酶切比较有说服力
6楼2010-07-16 15:51:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ymzfeng

金虫 (小有名气)

酶切和测序最保险了
PCR有假阳性
7楼2010-07-16 19:48:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 虫虫6527 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿2110,化学学硕310分,本科重点双非求调剂 +18 努力奋斗112 2026-04-08 18/900 2026-04-09 23:28 by wolf97
[考研] 计算机11408,286分求调剂 +9 木子念晞 2026-04-05 9/450 2026-04-09 20:04 by vgtyfty
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 材料考研求调剂总分280 +30 mkjlz1 2026-04-06 35/1750 2026-04-08 21:25 by cyh—315
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +6 我想上学!!6 2026-04-05 9/450 2026-04-08 17:45 by 宋小宝HQ
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 362求调剂 +8 我要考大 2026-04-06 12/600 2026-04-08 00:32 by JourneyLucky
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 318求调剂 +5 李青山山山 2026-04-07 5/250 2026-04-07 18:24 by 蓝云思雨
[考研] 081200-11408-367学硕求调剂 +4 1_2_3111 2026-04-06 4/200 2026-04-07 08:13 by jp9609
[考研] 302分求调剂 一志愿安徽大学085601 +12 zyx上岸! 2026-04-04 12/600 2026-04-07 02:09 by BruceLiu320
[考研] 求助 +3 卡卡东88 2026-04-06 4/200 2026-04-06 15:28 by going home
[考研] 313求调剂 +5 海日海日 2026-04-04 7/350 2026-04-05 13:58 by imissbao
[考研] 288求调剂,一志愿华南理工大学071005 +6 ioodiiij 2026-04-04 6/300 2026-04-05 10:09 by guoweigw
[考研] 341求调剂 +3 学无止境,冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 求调剂 +4 晟功? 2026-04-03 4/200 2026-04-04 21:58 by hemengdong
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 本科985,专业0812分336求调剂 +4 莫莫很行 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:31 by zhq0425
[考研] 一志愿重庆大学085404,总分314分,求调剂 +4 zf83hn 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:25 by 啵啵啵0119
[考研] 372分材料与化工(085600)一志愿湖南大学求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-03 4/200 2026-04-03 17:58 by Jimmyandyou
信息提示
请填处理意见