应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】筛选转化子
51/1返回列表
查看: 851  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

虫虫6527

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】筛选转化子 已有5人参与

我转化基因到TOP10，长出来的单菌落做PCR有时候没有带，但是提出质粒P就有带，不知道是什么原因，哪位指教一下，谢谢～
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-07-15 17:24:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jqq1985

银虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+2):谢谢分享 2010-07-16 10:59:01
引用回帖:
Originally posted by 虫虫6527 at 2010-07-15 19:40:16:

验证转化子直接用酶切成本有点高吧，验一次用半管酶

酶切10微升体系只要加0.3微升酶就够了，枪头蘸一下的量就可以了。再说按照经验，要是一个板子上挑了十个都没有一个对的基本就可以重做了。一般我挑4到6个，没一个对的我就重做了
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2010-07-16 10:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-15 18:20:43
直接提质粒酶切鉴定呗

PCR验证不保险，万一污染了什么的，结果不好解释

酶切是群体性质，比较保险
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-07-15 18:08:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫虫6527

银虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by ben1147 at 2010-07-15 18:08:36:
直接提质粒酶切鉴定呗

PCR验证不保险，万一污染了什么的，结果不好解释

酶切是群体性质，比较保险

验证转化子直接用酶切成本有点高吧，验一次用半管酶
赞一下 回复此楼
3楼2010-07-15 19:40:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1):欢迎交流！ 2010-07-15 22:20:19
引用回帖:
Originally posted by 虫虫6527 at 2010-07-15 19:40:16:

验证转化子直接用酶切成本有点高吧，验一次用半管酶

怎么会用那么多。。。。。。。。
Takara的Eco RI那么一大管子，得用多久啊。。。。。。
挑菌也挑不了多少啊，顶多二三十个克隆吧
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2010-07-15 20:42:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 300求调剂 +12 橙a777 2026-04-15 12/600 2026-04-18 23:51 by 路病情
[考研] 材料相关专业344求调剂双非工科学校或课题组 +24 hualkop 2026-04-12 26/1300 2026-04-18 23:33 by 路病情
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 320求调剂 +5 深郊akm 2026-04-17 5/250 2026-04-18 19:52 by 王珺璞
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 化工学硕294分，求导师收留 +33 yzyzx 2026-04-12 37/1850 2026-04-17 23:00 by wunaiy88
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-16 11/550 2026-04-17 22:34 by chixmc
[考博] 求博导｜生物质基多孔碳/超级电容方向，已有相关成果，寻能源材料/碳材料方向老师 +3 猪猪人Zzz 2026-04-12 3/150 2026-04-17 19:10 by 阳阳阳^_^
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 5/250 2026-04-17 10:02 by bobvan
[考研] 307中医考研调剂 +6 于以采蘩 2026-04-14 6/300 2026-04-16 16:20 by qingfeng258
[考研] 26药学专硕105500求调剂 +6 喽哈加油 2026-04-13 7/350 2026-04-16 14:31 by zhouxiaoyu
[考研] 327求调剂 +26 Xxjc1107. 2026-04-13 29/1450 2026-04-16 10:52 by Espannnnnol
[考研] 085801电气专硕272求调剂 +19 电气李 2026-04-13 21/1050 2026-04-15 13:37 by 黑科技矿业
[考研] 297工科调剂? +14 河南农业大学-能 2026-04-13 15/750 2026-04-15 13:25 by 黑科技矿业
[考研] 105500药学求调剂 +4 x_skys 2026-04-12 4/200 2026-04-14 13:37 by rndfc
[考研] 245求调剂 +6 冰糖橘?汽水 2026-04-13 10/500 2026-04-14 10:49 by jyl0317
[考研] 085600材料与化工329分求调剂 +24 叶zilin 2026-04-13 25/1250 2026-04-14 09:20 by 试管破裂
[考研] 考研英一数一338分 +9 长江大学东校区 2026-04-13 10/500 2026-04-14 00:41 by 王珺璞
[考研] 一志愿085802 323分求调剂 +13 drizzle_9 2026-04-12 14/700 2026-04-13 10:26 by Faiz5552
[考研] 调剂结束 +6 floriea 2026-04-12 8/400 2026-04-12 18:13 by zhouxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭