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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】跑胶
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】跑胶 已有9人参与


各位师兄师姐好，小妹半道转入分子生物学，刚起步，遇到很多问题得向大家求教。这是新近跑的琼脂糖电泳图，胶浓度1.5%，1*TAE，10*loading buffer，恒压90v，DL2000的marker，样品条带波浪形可能是什么原因呢，之前没有，换了电泳液也还是同样的情形。
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1楼 2010-07-14 14:21:57
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

catherine_

木虫 (正式写手)
图哩。。。
没图怎麽分析。。。
我看到的是叉烧包。。。
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2楼2010-07-14 14:27:17
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普通回帖

陈思容

铜虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
胶凝固的时间长一点
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3楼2010-07-14 14:28:42
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wzxzhh

木虫 (小有名气)
★
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-17 13:32:57
3楼说的有道理，凝固时间太长
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4楼2010-07-14 14:54:23
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-07-17 13:33:07
可能是拔梳子的时候猛了一点，把梳孔弄得不均匀了，另外可能是用了比较厚的梳子，但是点样量又很少，造成分布不均匀
其实薄梳子跑出来的条带很漂亮哦
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5楼2010-07-14 15:04:14
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-07-14 15:04:14:
可能是拔梳子的时候猛了一点，把梳孔弄得不均匀了，另外可能是用了比较厚的梳子，但是点样量又很少，造成分布不均匀
其实薄梳子跑出来的条带很漂亮哦

谢谢哦，说得很有道理，确实点样时发现量挺少的。那就是说把胶铺薄一点对吧，梳子倒是用了最小号的
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6楼2010-07-14 15:36:38
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by 陈思容 at 2010-07-14 14:28:42:
胶凝固的时间长一点

谢谢您。您指的是凝固时间不够吗
赞一下 回复此楼
7楼2010-07-14 15:38:23
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lhm_hnyj

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by catherine_ at 2010-07-14 14:27:17:
图哩。。。
没图怎麽分析。。。
我看到的是叉烧包。。。

馋了吧。
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8楼2010-07-14 15:40:20
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半夏无毒

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
感觉上胶好像铺的厚了不少~~~~
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9楼2010-07-14 15:44:33
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-07-15 04:02:34
引用回帖:
Originally posted by lhm_hnyj at 2010-07-14 15:36:38:

谢谢哦，说得很有道理，确实点样时发现量挺少的。那就是说把胶铺薄一点对吧，梳子倒是用了最小号的

胶的厚薄倒没有多大的影响
一方面，你可以让胶凝久一点，硬一点再拔梳子，同时拔之前用buffer润一下梳孔再拔，这样不容易拔烂梳孔
另一方面，点样的时候如果发现体积太小，比如才两三微升，那么可以加多点loading buffer，让样品有足够的体积可以扩散到梳孔的底部，一般5ul就能铺满最薄的那种梳子，0.75um的似乎是
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10楼2010-07-14 16:07:02
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