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liby

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】SDS-PAGE跑不出带 已有22人参与

我的目的蛋白大概是43KDa,我用了10%的分离胶,用考马斯亮蓝染色一个半小时,脱色一晚上,结果没带,marker都没出来,样品是我测过有酶活的发酵液。这是什么原因,请教各位
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月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+3):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-07-03 20:23:40
marker都没有,认真查找原因吧。
染色脱色感觉没多大问题,如有怀疑可以再染一次。
43KD也不太可能跑出去。再重复一次看看吧,注意细节。
5楼2010-07-03 11:15:09
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jiahaitao1016

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
染的时间不够吧,跑完胶加考马斯亮蓝后煮胶5min,然后脱色
3楼2010-07-03 10:41:39
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xzx135

铁杆木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
看天(金币+1):鼓励交流 2010-07-03 11:11:19
首先,我不认为是楼上说的对,染色时间够了。
我觉得是你的胶,或者电泳液出问题了,你看看SDS是不是加多了?这会让你的电泳跑得非常快,或者电泳液有问题,换新的。
4楼2010-07-03 11:03:45
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yaojc

木虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-07-03 20:23:47
重新配一下丙烯酰胺、甲叉丙烯酰胺以及电泳缓冲液的浓缩液,电泳时间要控制好。
专注、专心、专业
6楼2010-07-03 11:15:29
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