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【求助/交流】基因克隆前PCR产物都要纯化吗?
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xiaoru2010
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[交流]
【求助/交流】基因克隆前PCR产物都要纯化吗?
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如题,PCR产物克隆测序,结果会出现别的基因或比对不出任何东西,会不会是产物纯度不够,需要纯化?请问这个纯化有多重要??谢啦
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1楼
2010-06-29 09:40:55
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dianaofyezi
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1949stone(金币+1):有些也不需要 2010-06-29 17:20:24
如果直接是PCR产物测序肯定是需要纯化的,否则结果不仅仅是重叠峰的问题了。
如果是克隆的话,一般都是建议纯化的。纯化后可以将PCR产物里面的缓冲体系改变,增加做克隆的成功率等。但是如果有些人比较有经验的看到只有一条特异性的带,直接做克隆的也有。但是我知道的基本都是纯化后做克隆的。
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2010-06-29 10:38:54
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1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-06-29 17:19:19
最好是要啊,,,但是不纯化也可以啊
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老虎
2楼
2010-06-29 09:47:02
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1949stone:有些不用纯化 现在好多纯花费都是这些销售的人强加的 2010-06-29 17:20:07
据我们老板说非常重要。要不然测序的峰会有重叠的导致读不出碱基
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2010-06-29 09:58:28
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Originally posted by
阿娇
at 2010-06-29 09:58:28:
据我们老板说非常重要。要不然测序的峰会有重叠的导致读不出碱基
谢谢美女
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4楼
2010-06-29 10:05:31
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