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xiaoru2010

[交流] 【求助/交流】基因克隆前PCR产物都要纯化吗? 已有12人参与

如题,PCR产物克隆测序,结果会出现别的基因或比对不出任何东西,会不会是产物纯度不够,需要纯化?请问这个纯化有多重要??谢啦
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阿娇

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone:有些不用纯化 现在好多纯花费都是这些销售的人强加的 2010-06-29 17:20:07
据我们老板说非常重要。要不然测序的峰会有重叠的导致读不出碱基
3楼2010-06-29 09:58:28
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查看全部 16 个回答

琴瑟不鸣

铁虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-06-29 17:19:19
最好是要啊,,,但是不纯化也可以啊
老虎
2楼2010-06-29 09:47:02
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xiaoru2010

引用回帖:
Originally posted by 阿娇 at 2010-06-29 09:58:28:
据我们老板说非常重要。要不然测序的峰会有重叠的导致读不出碱基

谢谢美女
4楼2010-06-29 10:05:31
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):有些也不需要 2010-06-29 17:20:24
如果直接是PCR产物测序肯定是需要纯化的,否则结果不仅仅是重叠峰的问题了。
如果是克隆的话,一般都是建议纯化的。纯化后可以将PCR产物里面的缓冲体系改变,增加做克隆的成功率等。但是如果有些人比较有经验的看到只有一条特异性的带,直接做克隆的也有。但是我知道的基本都是纯化后做克隆的。
52187644
5楼2010-06-29 10:38:54
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