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iamzhihui

铁虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】测序只能测出一半!请大家帮忙分析下! 已有11人参与

送去测序,测了两遍。都只测出前700bp,测序正确,而片段总长1400bp。blast后面的700bp,显示的是目的基因。请大家分析下,我们是否得到了基因片段?是测序出了问题,还是我们的问题?
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fascinating

银虫 (正式写手)


1949stone(金币+1):可以达到一千一后的 你说的也有道理 2010-06-14 13:13:16
iamzhihui(金币+1):谢谢帮助! 2010-07-02 14:43:18
你是怎么测的 单向测了两次还是测的双向,1.4K的片段单向是测不完的呀,只能测6 ,7 百左右,你让公司直接测通就好了吧
4楼2010-06-14 10:42:47
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seahow

木虫 (著名写手)

iamzhihui(金币+1):谢谢帮助! 2010-07-02 14:42:44
我觉得你得到了目的片段! 因为酶切鉴定没有问题。

测序不同多半是GC问题,呵呵。
建议你反向测序,或者设计新引物吧。

gooooooooood luck
2楼2010-06-14 10:30:46
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张力民1598

铜虫 (小有名气)

iamzhihui(金币+1):谢谢帮助! 2010-07-02 14:43:23
用通用引物测通即可
5楼2010-06-14 11:44:33
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iamzhihui

铁虫 (初入文坛)

测序测通

两次测序是要求测通的,但是拿到的都是前面700bp片段,前面的全部比对正确。但是后面的就不吻合了。有没有可能是中间缺失一段呢?麻烦大家帮忙分析下。
6楼2010-06-14 11:48:59
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