24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 615  |  回复: 5

lvtd

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】引物设计 已有5人参与

我设计了以对引物,TM值上游是63.5 下游是61.5 如果加上酶切位点和保护碱基就快到80了,那么退火温度怎么办啊?哪个大虾给点意见啊~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

tobeornottobe,thisisaquestion!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

睡着数绵羊

银虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+1):谢谢交流 2010-06-11 15:25:08
你可以做个温度梯度,然后再选择合适的温度。
2楼2010-06-11 14:55:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ben1147

木虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2):谢谢分享。 2010-06-12 04:08:34
新引物总是要做退火温度梯度来优化条件的,选择好的温度

如果直接P的话,可以前3-5个循环用稍低的温度(认为此时多余的碱基不与模板结合,不算在Tm之内)

后面的几十个循环用高温度
3楼2010-06-11 15:49:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ljsh

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
退火温度设定,不应包括酶切位点和保护碱基。以TM值上游是63.5 下游是61.5为准。
4楼2010-06-12 01:48:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biogefart

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
理论是理论,直接用53度先试试
闹太套
5楼2010-06-12 07:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvtd

金虫 (小有名气)

谢谢各位了,我试试先。
tobeornottobe,thisisaquestion!
6楼2010-06-12 08:18:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lvtd 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿京区985,085401电子信息,本科电子信息 +3 阳光开朗的男孩 2026-04-10 3/150 2026-04-10 16:29 by sophia_93
[硕博家园] 0856材料化工求调剂,一志愿211,初试成绩349 +5 江淮北月 2026-04-05 5/250 2026-04-10 16:26 by 高维春
[考研] 求调剂 +14 MAX怅惘 2026-04-09 15/750 2026-04-10 13:56 by ajpv风雷
[考研] 0858求调剂 5+5 Gky09300550, 2026-04-10 7/350 2026-04-10 11:37 by may_新宇
[考研] 301求调剂 +6 静静想想 2026-04-05 6/300 2026-04-10 09:15 by Delta2012
[考研] 计算机类求调剂,22408-274分 +5 上岸de小虫 2026-04-09 6/300 2026-04-09 20:48 by xujun0624
[考研] 材料299专硕求调剂 +10 +21 2026-04-09 10/500 2026-04-09 17:34 by 1753564080
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 322求调剂,08工科 +3 今天是个小号 2026-04-08 3/150 2026-04-09 15:53 by wp06
[考研] 280求调剂 +7 wzzz王 2026-04-09 7/350 2026-04-09 15:32 by 释放天性
[考研] 一志愿西南大学生物学学硕344 求生物学相关调剂/生物与医药 +7 超人不会飞@ 2026-04-08 7/350 2026-04-09 09:35 by gong120082
[考研] 一志愿211,0703化学305分求调剂 +20 严西西戏 2026-04-06 26/1300 2026-04-08 22:12 by 凯凯要变帅
[考研] 专硕0854初试考材科基,求调剂 +7 3220548044 2026-04-06 10/500 2026-04-08 21:59 by hypershenger
[考研] 考研求调剂 +4 雯??? 2026-04-08 4/200 2026-04-08 21:44 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +21 吃的不少 2026-04-05 24/1200 2026-04-08 16:47 by sunhuadong
[考研] 计算机408|在校多次国家级竞赛获奖|申请调剂 +4 东山大白鹅 2026-04-05 4/200 2026-04-08 00:18 by chongya
[考研] 生物医药调剂|SCI中科院三区一作+多项科研成果 +8 likangxing 2026-04-07 11/550 2026-04-08 00:02 by lys0704
[考研] 22408 一志愿双一流人工智能300分 四六级,数据分析国奖 +4 zzfeng123 2026-04-06 6/300 2026-04-07 21:02 by zzfeng123
[考研] 085404 293求调剂 +8 勇远库爱314 2026-04-06 9/450 2026-04-07 13:05 by flydream1314
[考研] 342求调剂 +3 Liang7111 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:47 by dongzh2009
信息提示
请填处理意见