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维纳斯的骑士

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[交流] 【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系已有4人参与

同上，请教NEB的pmeI的酶切体系，最近在做一个克隆，用pmeI和EcoRI酶切，这两个酶没有共同的buffer，只能单个切，中间用纯化的方法和乙醇沉淀的方法都试过了，但是一直没挑到正确的转化子，只有一些空载质粒，大家能不能给些建议啊，谢谢！

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1楼2010-06-02 07:21:52

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我用的是不同公司的pmeI和EcoRI酶

3楼2010-06-02 16:39:32

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嗯，我拿这两个酶一起双酶切看看，但是请教一下如果单酶切的话，一个一个割胶回收效率会比较低，而且两个酶切位点相距比较近，胶上也看不出来是否切开吧

6楼2010-06-02 17:38:22

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嗯，受益非浅，有问题再请教你啊

8楼2010-06-02 18:07:22

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