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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】请教NEB的pmeI的酶切体系 已有4人参与

同上，请教NEB的pmeI的酶切体系，最近在做一个克隆，用pmeI和EcoRI酶切，这两个酶没有共同的buffer，只能单个切，中间用纯化的方法和乙醇沉淀的方法都试过了，但是一直没挑到正确的转化子，只有一些空载质粒，大家能不能给些建议啊，谢谢！
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1楼 2010-06-02 07:21:52
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
嗯，我拿这两个酶一起双酶切看看，但是请教一下如果单酶切的话，一个一个割胶回收效率会比较低，而且两个酶切位点相距比较近，胶上也看不出来是否切开吧
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6楼2010-06-02 17:38:22
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用共同的buffer啊，buffer 4 啊。
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Thank-you，so-blue.
2楼2010-06-02 08:55:10
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维纳斯的骑士

金虫 (小有名气)
我用的是不同公司的pmeI和EcoRI酶
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3楼2010-06-02 16:39:32
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
各个公司的酶差别不大，你可以用两种不同的酶，用BUFFER4，怕什么！@！！
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4楼2010-06-02 16:45:45
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