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wangxueqin金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】怎么就是p不出目的片段啊 已有14人参与
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向高手请教： 目前在扩一个片段，已经有人用这对引物扩过，都得到的是800bp的片段，我第一次扩的时候直接用56的退火温度（查文献说这个片段GC含量较高，需较高退火温度，引物不是我们自己设计的，是前人文章中得来的），结果很好，整齐且亮的主带，没有任何杂带，虽然大小不对， 我还是将结果送去测序，可是结果回来根本不是我们要扩的片段中的，连一部分也不是。昨天我又用48的退火温度做了个，可是依旧是只有200bp附近有主带，在800bp附件连杂带也是非常弱的啊。 请问下高手有何方法，可以把800bp的带给扩出来啊，因为前人做过实验证实是可以扩出来的。多谢多谢。 有图  |
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估计是用了特殊的PCR方法吧，继续摸索条件吧 
8楼2010-05-26 13:34:21
liyong1981 
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