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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】镍拄纯化的问题
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匿名

用户注销 (正式写手)
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1楼 2010-05-17 11:24:06
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jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wulie0411 at 2010-05-17 14:01:11:
一般来将经过镍柱纯化就比较纯了，非特异性吸附可以通过低浓度的咪唑梯度洗下去，之后再用高浓度的咪唑把目的蛋白洗下来，经过优化的洗脱条件，电泳检测纯化结果应该是单条带的

只用镍柱做到电泳单条带真的不容易，
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9楼2010-05-17 16:43:45
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gaozx123

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
还可以吧，我一个师兄就曾经做过，看过他的结果，就目的条带。可能跟表达的蛋白有关吧。
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2楼2010-05-17 11:38:17
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biogefart

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
生物学没有绝对的结果，每个蛋白得自己摸条件
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闹太套
3楼2010-05-17 11:44:20
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wzgen1983

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):支持~~ 2010-05-17 15:29:50
很干净不现实，只能说，挂上去的主要都是目的蛋白，因为其他蛋白液可能会有非特异性吸附。过镍柱后，在电泳上只能看到单条带，也不能说明是纯的蛋白，因为电泳也有个检查限的。
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4楼2010-05-17 12:03:34
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