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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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匿名

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gaozx123

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
还可以吧,我一个师兄就曾经做过,看过他的结果,就目的条带。可能跟表达的蛋白有关吧。
2楼2010-05-17 11:38:17
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biogefart

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
生物学没有绝对的结果,每个蛋白得自己摸条件
闹太套
3楼2010-05-17 11:44:20
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wzgen1983

金虫 (正式写手)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1):支持~~ 2010-05-17 15:29:50
很干净不现实,只能说,挂上去的主要都是目的蛋白,因为其他蛋白液可能会有非特异性吸附。过镍柱后,在电泳上只能看到单条带,也不能说明是纯的蛋白,因为电泳也有个检查限的。
4楼2010-05-17 12:03:34
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2585165

金虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
很干净基本上是做不到的。一般是用多种纯化方法结合。
哎呀呀,别老说我丑,比起小时候,我这还真算是漂亮了!
5楼2010-05-17 12:09:47
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wulie0411

木虫 (小有名气)

★ ★
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lstt09nk(金币+1):欢迎多多交流~~ 2010-05-17 15:30:33
一般来将经过镍柱纯化就比较纯了,非特异性吸附可以通过低浓度的咪唑梯度洗下去,之后再用高浓度的咪唑把目的蛋白洗下来,经过优化的洗脱条件,电泳检测纯化结果应该是单条带的
6楼2010-05-17 14:01:11
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biochem301

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从分离效果来看,还是不错,虽然有不少非特异性结合,但是主要条带还是分离开了
7楼2010-05-17 14:25:22
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月月大可

木虫 (著名写手)

★ ★
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lstt09nk(金币+1):感谢交流~~ 2010-05-17 15:31:05
如果你选择少量高纯度,那你就用较高浓度咪唑Washing buffer,这样会纯一些。如果想保证较大的量,就不要期望很高的纯度。
8楼2010-05-17 14:40:55
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jasco

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by wulie0411 at 2010-05-17 14:01:11:
一般来将经过镍柱纯化就比较纯了,非特异性吸附可以通过低浓度的咪唑梯度洗下去,之后再用高浓度的咪唑把目的蛋白洗下来,经过优化的洗脱条件,电泳检测纯化结果应该是单条带的

只用镍柱做到电泳单条带真的不容易,
9楼2010-05-17 16:43:45
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lijunping68


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
我们为了保证蛋白纯度可能要多过几次镍柱
10楼2010-05-19 23:20:00
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