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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 【求助/交流】有没有做过植物切片的
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小木虫小小

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】有没有做过植物切片的 已有5人参与

想学习点关于植物切片方面的知识，有哪位高人这方面的经验丰富，帮助一下。就是想看看茎秆中通气组织占的比例。

采集不同的处理条件下的植物样，移苗后，每月采集一次植株，立刻称重，然后切割茎秆。每次取样部位尽量一致，以减少变异性。截取的茎秆长度为5cm。样品取好后立即放入FAA固定液（50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml）并抽真空15分钟确保所有样品全部沉底，然后在固定液中固定24小时。经FAA固定的样品依次移入50%、60%、75%、85%、95%、100%的梯度乙醇溶液中进行脱水处理，脱水后用0.1%曙红（EosinY）染色。样品浸蜡前要在3/1、1/1、1/3的乙醇/Histoclear及3/1、1/1、1/3的Histoclear/石蜡中过度浸透，然后在60℃温度条件下浸蜡3天，每天换蜡两次。最后包埋、切片（厚度为8μm）。切片经过脱蜡，在光学显微镜下观察（Sanderson，1994）。

上面方法怎样？有什么要注意的么？
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1楼 2010-05-16 08:01:01
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小木虫小小

至尊木虫 (职业作家)
好的，非常感谢
到时候再有什么不懂的想你请教了 呵呵
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3楼2010-05-16 20:22:20
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lixg

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-05-16 12:58:24
没太大问题，有几个细节需要注意：1. 截取茎秆的长度过长。最好控制在0.5厘米，以利于固定剂渗透，也可避免切片时发颤。再着说太长也无必要。 2. 100%乙醇以两次为妥。3. 因为通气组织的细胞壁较薄，固定剂最好用3-4%的戊二醛，材料的结构会保持的更好。如果仅仅是进行统计而不需要照片的话，徒手切片也未尝不可。仅作参考。
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2楼2010-05-16 08:54:15
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小木虫小小

至尊木虫 (职业作家)
要是做徒手切片的话，有没有具体的操作步骤的资料什么的推荐的啊？
我要计算通气组织的面积占茎秆总面积的比例，谢谢了啊
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4楼2010-05-16 22:28:30
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大同静逸

银虫 (小有名气)

我有个师姐做过水稻通气组织研究

我也做过一点切片。认为，抽真空虽有利于浸透，但可能对通气组织造成破坏。请参考。
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共同创造美好未来！
5楼2010-06-17 23:11:45
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