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q317476148铁杆木虫 (著名写手)
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关于酒精固定组织
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| 95%酒精固定大鼠心脏需要多长时间固定，，，求大师指教 |
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木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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不建议用95%酒精固定，如需特殊固定除外。 酒精为最常用的脱水剂。它可与水随意混合，脱水能力较强，并且可硬化组织。酒精的穿透速度很快，对组织有较明显的收缩作用。为避免组织过度收缩，在用酒精作为脱水剂时．应从低浓度开始，然后再依次增加其浓度。一般从70％酒精开始，经80％，90％，95％酒精，尔后至无水酒精。对于少数柔嫩组织应从50％或30％酒精开始脱水。但也应注意，对于一些需特殊处理的标本，如进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本，为较好的保存物质的结构(它们在水中会溶解消失)，应直接用无水酒精固定。经无水酒精固定的组织，更换一次无水酒精脱水即可。一般情况下，组织经上述处理，即可达到脱水要求。但大量组织块同时进行脱水时，为达到满意的脱水效果，常经过95％酒精和无水酒精各两次。但注意组织块在纯酒精中放置时间不宜过长，防止组织过度硬化造成切片困难。无水酒精经应用后，很难保证无水，因此应在无水酒精容器内加入硫酸铜吸收水分。硫酸铜遇水变蓝后，即应更换无水硫酸铜或更换纯酒精。但放人容器的硫酸铜最好不要与组织块接触，可在硫酸铜表面加一块滤纸。对于标本量较大的单位，应经常更换酒精，对于标本量少，又不经常进行切片的基层单位，可用以上方法。脱水的时间与组织块大小有关，对于1．5cm×1．5 cm × 0．2—0．3 cm的组织块，一船脱水时间如下：70％酒精数分钟，80％、95％、95％、t00％、100％酒精各2—4h，将酒精在温箱加温可缩短脱水时间。对于小块组织，80％一100％酒精30—45min即可。但对于结构紧密的组织(如致密结缔组织等)和大块组织则不适用，应根据具体情况进行调整。另外，脂肪组织和疏松结缔组织应延长脱水时间，在95％酒精中水分必须洗净，脂肪必须溶解掉。否则石蜡不能渗入脂肪细胞和纤维组织，无法切出好的切片，而且染色时也容易脱片。这样的组织蜡块，因含有水分，经与空气接触后即干燥出现凹陷。 |
2楼2012-08-05 12:08:34
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3楼2012-08-05 13:58:05
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5楼2012-08-06 09:53:07
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