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q317476148铁杆木虫 (著名写手)
喵星人
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[求助]
关于酒精固定组织
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| 95%酒精固定大鼠心脏需要多长时间固定,,,求大师指教 |
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q317476148
铁杆木虫 (著名写手)
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3楼2012-08-05 13:58:05
qq530bbs
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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不建议用95%酒精固定,如需特殊固定除外。 酒精为最常用的脱水剂。它可与水随意混合,脱水能力较强,并且可硬化组织。酒精的穿透速度很快,对组织有较明显的收缩作用。为避免组织过度收缩,在用酒精作为脱水剂时.应从低浓度开始,然后再依次增加其浓度。一般从70%酒精开始,经80%,90%,95%酒精,尔后至无水酒精。对于少数柔嫩组织应从50%或30%酒精开始脱水。但也应注意,对于一些需特殊处理的标本,如进行糖原和尿酸盐结晶染色的标本,为较好的保存物质的结构(它们在水中会溶解消失),应直接用无水酒精固定。经无水酒精固定的组织,更换一次无水酒精脱水即可。一般情况下,组织经上述处理,即可达到脱水要求。但大量组织块同时进行脱水时,为达到满意的脱水效果,常经过95%酒精和无水酒精各两次。但注意组织块在纯酒精中放置时间不宜过长,防止组织过度硬化造成切片困难。无水酒精经应用后,很难保证无水,因此应在无水酒精容器内加入硫酸铜吸收水分。硫酸铜遇水变蓝后,即应更换无水硫酸铜或更换纯酒精。但放人容器的硫酸铜最好不要与组织块接触,可在硫酸铜表面加一块滤纸。对于标本量较大的单位,应经常更换酒精,对于标本量少,又不经常进行切片的基层单位,可用以上方法。脱水的时间与组织块大小有关,对于1.5cm×1.5 cm × 0.2—0.3 cm的组织块,一船脱水时间如下:70%酒精数分钟,80%、95%、95%、t00%、100%酒精各2—4h,将酒精在温箱加温可缩短脱水时间。对于小块组织,80%一100%酒精30—45min即可。但对于结构紧密的组织(如致密结缔组织等)和大块组织则不适用,应根据具体情况进行调整。另外,脂肪组织和疏松结缔组织应延长脱水时间,在95%酒精中水分必须洗净,脂肪必须溶解掉。否则石蜡不能渗入脂肪细胞和纤维组织,无法切出好的切片,而且染色时也容易脱片。这样的组织蜡块,因含有水分,经与空气接触后即干燥出现凹陷。 |

2楼2012-08-05 12:08:34
amisking
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4楼2012-08-05 18:52:20
q317476148
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