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小木虫小小

至尊木虫 (职业作家)

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[交流] 【求助/交流】有没有做过植物切片的已有5人参与

想学习点关于植物切片方面的知识，有哪位高人这方面的经验丰富，帮助一下。就是想看看茎秆中通气组织占的比例。

采集不同的处理条件下的植物样，移苗后，每月采集一次植株，立刻称重，然后切割茎秆。每次取样部位尽量一致，以减少变异性。截取的茎秆长度为5cm。样品取好后立即放入FAA固定液（50%或70%酒精90ml + 冰醋酸5ml + 福尔马林(37%~40%甲醛)5ml）并抽真空15分钟确保所有样品全部沉底，然后在固定液中固定24小时。经FAA固定的样品依次移入50%、60%、75%、85%、95%、100%的梯度乙醇溶液中进行脱水处理，脱水后用0.1%曙红（EosinY）染色。样品浸蜡前要在3/1、1/1、1/3的乙醇/Histoclear及3/1、1/1、1/3的Histoclear/石蜡中过度浸透，然后在60℃温度条件下浸蜡3天，每天换蜡两次。最后包埋、切片（厚度为8μm）。切片经过脱蜡，在光学显微镜下观察（Sanderson，1994）。

上面方法怎样？有什么要注意的么？

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1楼 2010-05-16 08:01:01

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lixg

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amisking(金币+2):鼓励交流！ 2010-05-16 12:58:24

没太大问题，有几个细节需要注意：1. 截取茎秆的长度过长。最好控制在0.5厘米，以利于固定剂渗透，也可避免切片时发颤。再着说太长也无必要。 2. 100%乙醇以两次为妥。3. 因为通气组织的细胞壁较薄，固定剂最好用3-4%的戊二醛，材料的结构会保持的更好。如果仅仅是进行统计而不需要照片的话，徒手切片也未尝不可。仅作参考。