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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酵母菌落PCR已有8人参与

请问做毕赤酵母表达的虫友们:

如果在做菌落PCR的时候,不用Lyticase的话,完全按照最普通的预变性94度,2min;(94度,1min;55度,1min;72度,1min)30循环,72度,7min的话,能否成功菌落PCR?

[ Last edited by pidou213 on 2010-5-11 at 22:33 ]
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见得多爱的多
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chenliangqiang

金虫 (小有名气)

我做过酵母的菌落pcr
你可以挑取少量菌体到ddH2O,中,涡旋2min,然后离心,取1ul作为模板应该就可以了。Tag酶最好用MIX
笨宝宝
10楼2010-05-12 11:06:46
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jasco

木虫 (正式写手)

预变性94度,10min, 再往后做就可以了
3楼2010-05-11 11:27:03
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★ ★
amisking(金币+3):不错! 2010-05-11 11:46:41

试试这个吧
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2010-05-11 11:41:04
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gaiyf

金虫 (正式写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-11 19:40:53
pidou213(金币+1):谢谢你啊! 2010-05-11 22:38:20
如果你是直接挑斑pcr的话可是试试在pcr之前先挑取少量的菌斑与30ul无菌水中,然后先液氮冷冻再沸水浴,如此反复三次,然后再取适量的冻容好的液体做模板,效果很好的
多看文献,多学知识
5楼2010-05-11 12:00:22
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