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beidong6938

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[交流] 【求助/交流】PCR同一体系、温度结果却不同已有14人参与

我们做的pcr用的同一个体系，同一个温度，前两次扩增都有清晰地条带，第三次非常模糊！第一次和第二次都用的同一个模板，第三次是成批做的，也包括前面用的模板，但结果不好！求高人指教

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1楼 2010-05-07 10:35:28

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yujiaping1

木虫 (著名写手)

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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-05-07 18:53:30

如果前面两次是分加的，那么最可能的原因有两个，一是混合样没有混匀，第二是分加的酶的量会大（因为比较粘，用量少，枪头会粘很多），所以可以适当考虑多加一点酶试试。
楼上几位说模板的可能性比较大，也很有道理，还是仔细看一下实验的区别吧。
有的时候就是这样，有的实验存在初始扩增随机选择问题，不是每次结果都一样