应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】哪位高人做过反转录？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
61/1返回列表
查看: 613  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

loveedward

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】哪位高人做过反转录？ 已有5人参与

现在需要从Candida中通过反转录克隆目的基因。而现在没有查到该基因的相关信息，只知道编码的目的蛋白的大小约为46KDa。想请教一下具体的实验过程。还望不吝赐教！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-05-05 20:14:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

poog502

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
scelab(金币+3):欢迎多来交流！:tiger06: 2010-05-05 23:46:25
先找到其他与Candida相近的物种中克隆到的该基因的mRNA和氨基酸序列（越多越好），通过软件alignment的比对功能查找该基因的保守区（序列比对后颜色相同的区域，通常为黄色）。根据氨基酸序列的保守区找到mRNA序列的保守区，根据此保守区设计简并引物，进行同源克隆。
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2010-05-05 20:24:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Candida全基因已经测序了，从上面克隆个基因不是难事吧
赞一下(1人) 回复此楼
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
3楼2010-05-05 20:29:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

loveedward

银虫 (小有名气)
我做的是一种氧化还原酶，以前也比较过相似的底物的基因序列，但是发现这种酶的保守性很低，同一种底物的不同Candida中的酶的相似性都很低。所以想通过反转录用Olige dT进行非特异性扩增
赞一下 回复此楼
4楼2010-05-05 20:44:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lingn

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
用Olige dT反转录出来的是全部的cDNA，回头做PCR的时候开始要回来设计引物。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2010-05-05 22:28:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意一楼的做法，首先确认同源物种的该基因信息。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2010-05-07 00:12:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 loveedward 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +9 小蜡新笔 2026-03-29 10/500 2026-03-31 19:52 by Dyhoer
[考研] 一志愿武理材料工程302调剂环化或化工 +8 Doleres 2026-03-31 8/400 2026-03-31 19:09 by Wang200018
[考研] 085600 一志愿9 总分351 求调剂学校 +7 czhcz 2026-03-31 7/350 2026-03-31 18:54 by 小张做实验
[考研] 求调剂 +9 akdhjs 2026-03-31 10/500 2026-03-31 17:14 by zhyzzh
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +10 XX小邓 2026-03-29 10/500 2026-03-31 16:46 by 不吃魚的貓
[考研] 化学0703 调剂 306分 一志愿211 +10 26要上岸 2026-03-28 10/500 2026-03-31 16:04 by 记事本2026
[考研] 282求调剂 不挑专业 求收留 +4 Yam. 2026-03-30 5/250 2026-03-31 14:41 by 王亮_大连医科大
[考研] 本科211安全工程，初试290分，求调剂 +3 2719846834 2026-03-28 3/150 2026-03-31 13:52 by 热情沙漠
[考研] 274求调剂 +6 xiao爱同学 2026-03-30 6/300 2026-03-31 10:04 by cal0306
[考研] 0817化工学硕调剂 +7 努力上岸中！ 2026-03-31 7/350 2026-03-31 09:58 by nalakaiqi
[考研] 291求调剂 +12 Y-cap 2026-03-29 15/750 2026-03-31 09:25 by Huaxue_Wang
[考研] 一志愿大连理工大学材料求调剂 +6 Gymno 2026-03-30 6/300 2026-03-31 07:26 by 无际的草原
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 抱歉 +3 田洪有 2026-03-30 3/150 2026-03-30 19:11 by 迷糊CCPs
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 0703化学求调剂，各位老师看看我！！！ +5 祁祺祺 2026-03-25 5/250 2026-03-27 21:44 by 东方猪猪
[考研] 085600，材料与化工321分，求调剂 +9 大馋小子 2026-03-27 9/450 2026-03-27 14:30 by mmm just
[考研] 298调剂 +3 jiyingjie123 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:57 by wxiongid
[考研] 309求调剂 +4 gajsj 2026-03-25 5/250 2026-03-26 00:27 by Dyhoer
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭