应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】pET-28a在大肠杆菌K-12中拷贝数
121/2返回列表12下一页
查看: 3378  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jackiechan

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】pET-28a在大肠杆菌K-12中拷贝数 已有6人参与

请问各位，有谁知道pET-28a在大肠杆菌K-12中拷贝数是多还是少，我用pET-28a做转化但从转化子中总是提不出质粒.谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2010-04-28 16:16:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-28 21:16
刚才我说错了，的确是低拷贝质粒，主要是我平时用的很多，没有提取问题。你稍微摇时间长一点，12小时左右吧。1ml菌提的质粒足够做克隆用的了。

[ Last edited by winter_gates on 2010-4-28 at 17:08 ]
赞一下(2人) 回复此楼
For my life！
2楼2010-04-28 16:45:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+1): 2010-04-28 21:16
PET载体都是低拷贝的载体，建议你加大菌量，菌液浑浊了么？如果浑浊了就应该提得到啊，即使量不多，莫非有噬菌体作祟？
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2010-04-28 16:54:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)
已经有点发白了，很浑浊了,我加大菌量试试，谢谢
赞一下 回复此楼
4楼2010-04-28 21:07:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)
我从BL21里提过pet28a，效果很好，难道pet28a在k12与bl21中拷贝数不一样吗
赞一下 回复此楼
5楼2010-04-28 21:09:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+1): 2010-04-29 15:36
哈哈，你说多了～BL21DE3是高效表达pET载体的菌株，能利用T7启动子高效表达，有的菌株，就不会得到很多质粒和蛋白，你最好看一下你的菌株的基因型，希望对你有帮助
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2010-04-29 10:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
呵呵，提取出一点后转化到常用的top10等克隆宿主中，这下再大提。
赞一下(1人) 回复此楼
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
7楼2010-04-29 10:39:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jackiechan

木虫 (小有名气)
谢谢，我有点不明白，质粒拷贝数和基因表达强弱有必然关系吗，拷贝数低可能表达强吗,
赞一下 回复此楼
8楼2010-04-29 12:50:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
可以啊，关键是看宿主菌啊～
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2010-04-29 16:43:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

winter_gates

金虫 (正式写手)

生命过客
引用回帖:
Originally posted by jackiechan at 2010-04-29 12:50:16:
谢谢，我有点不明白，质粒拷贝数和基因表达强弱有必然关系吗，拷贝数低可能表达强吗,

怎么说能有关系，但不是绝对关系，只要你的启动子足够强，不需要很多的拷贝数的。
赞一下 回复此楼
For my life！
10楼2010-05-03 10:52:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jackiechan 的主题更新
121/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学工程321分求调剂 +9 大米饭！ 2026-03-15 11/550 2026-03-16 21:39 by 大米饭！
[文学芳草园] 伙伴们，祝我生日快乐吧 +17 myrtle 2026-03-10 26/1300 2026-03-16 18:32 by 青橙Ln
[考研] 0703化学调剂 +6 妮妮ninicgb 2026-03-15 9/450 2026-03-16 16:40 by houyaoxu
[考研] 321求调剂 +5 大米饭！ 2026-03-15 5/250 2026-03-16 16:33 by houyaoxu
[考研] 材料与化工求调剂 +3 为学666 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:09 by 加号+
[考研] 材料与化工专硕调剂 +3 heming3743 2026-03-16 3/150 2026-03-16 15:05 by peike
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[硕博家园] 深圳大学硕士招生（2026秋，传感器方向，仅录取第一志愿） +4 xujiaoszu 2026-03-11 8/400 2026-03-16 09:45 by xujiaoszu
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 318求调剂 +3 李新光 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:21 by JourneyLucky
[考研] 材料371求调剂 +9 鳄鱼? 2026-03-11 11/550 2026-03-13 22:53 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 Mochaaaa 2026-03-12 7/350 2026-03-13 22:18 by 星空星月
[考研] 一志愿西南交大，材料专硕317求调剂 +5 lx8568 2026-03-11 5/250 2026-03-13 21:43 by peike
[考研] 315求调剂 +9 小羊小羊_ 2026-03-11 10/500 2026-03-13 21:13 by SXNU李老师
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 277求调剂 +4 anchor17 2026-03-12 4/200 2026-03-13 11:15 by 白夜悠长
[考研] 420求调剂 +4 莫向外求11 2026-03-10 6/300 2026-03-12 14:41 by ruiyingmiao
[硕博家园] 木虫好像不热闹了，是不是？ +4 偏振片 2026-03-10 4/200 2026-03-10 09:51 by longwave
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭