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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】293T细胞培养求助
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keyanhrc

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】293T细胞培养求助 已有2人参与

最近养的293T细胞总是成堆生长，细胞间总有小颗粒，状态不好。前一段时间状态很好，近几天就突然不行了。以前也这样过，时好时坏的，这问题怎么解决呢？着急做实验呀，眼看就要过年了，想赶紧把实验做完，放心地回家过年呀！拜托大家啦！
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1楼 2010-01-24 15:20:16
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yang0071

木虫 (职业作家)
★ ★
amisking(金币+2): 1-24 17:18
估计是污染了
颗粒是啥样子的？
加大抗生素浓度试试
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2楼2010-01-24 15:43:45
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
amisking(金币+1): 1-24 17:18
最好上图，怀疑是支原体
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3楼2010-01-24 16:28:44
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liyangmiscap

木虫 (著名写手)
★ ★
amisking(金币+2): 1-24 17:18
也许是被污染了。若果有冻存的细胞可以考虑重新复苏一瓶。培养基最好也检查一下的
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愿与你携手，沿河看柳
4楼2010-01-24 17:11:06
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amisking

荣誉版主 (文坛精英)

优秀区长优秀版主
应该是污染了！
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如果没有人帮助你，那么你就去帮助别人。
5楼2010-01-24 17:18:42
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gaozx123

金虫 (小有名气)
重新用胰酶消化一下，让细胞重新贴壁，换用新鲜的培养基，加点抗生素，应该没问题。
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6楼2010-01-24 17:42:08
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keyanhrc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yang0071 at 2010-1-24 15:43:
估计是污染了
颗粒是啥样子的？
加大抗生素浓度试试

我们以前也经历过这情况，小颗粒只是“从犯”，它的数量是随细胞状态变化的，细胞状态好它就少或消失。现在的关键问题是，前几天还好好的，亮晶晶的细胞突然就变得像是个张开的大伞一样，且成团生长，状态萎靡不振了，按说细胞应该是能无限传代的，但我们这些细胞刚复苏时都很好，传个十几代就这样了，这是什么原因呢？头疼！
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7楼2010-01-24 21:12:13
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keyanhrc

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by gaozx123 at 2010-1-24 17:42:
重新用胰酶消化一下，让细胞重新贴壁，换用新鲜的培养基，加点抗生素，应该没问题。

首先非常感谢诸位热心虫子们的回复！

我们也这样试过了，不行，还是像张开的大伞一样，一旦进入这种状态就很难挽回，不知是什么因素使细胞进入这种状态的呢？
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8楼2010-01-24 21:17:42
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Sebastian

银虫 (小有名气)
★ ★ ★
keyanhrc(金币+3):谢谢您的分析，虽然买这药的可能性不大，呵呵.......... 1-25 09:39
引用回帖:
Originally posted by keyanhrc at 2010-1-24 21:12:



我们以前也经历过这情况，小颗粒只是“从犯”，它的数量是随细胞状态变化的，细胞状态好它就少或消失。现在的关键问题是，前几天还好好的，亮晶晶的细胞突然就变得像是个张开的大伞一样，且成团生长，状态萎 ...

小黑点很可能和支原体有关系，我用invivogen的支原体专杀药Plasmocin处理之后（处理时间和使用浓度参考说明书），小黑点没有了，细胞形态也回复正常，推荐使用下，虽然有点贵。因为支原体感染会造成细胞生长减缓（尤其是在细胞少的时候），一团细胞中新分裂出来的处于最边缘的细胞比这一团细胞中间的细胞“年轻”了太多，中间的“老”细胞受了外面细胞太久的挤压形态就会异常。正常细胞因为分裂的快，中间的“老细胞”不会受到这么久的挤压你就传代了，传代的时候传得太稀了也会出现类似的现象。
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9楼2010-01-24 22:03:16
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huanglimei

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
这个问题最近也有碰到。传代操作结束后，在显微镜观察，细胞的分散性很好，为什么贴壁后就成小堆贴壁生长？到了第四天早上去看细胞，竟然全都漂起来了。怀疑是污染，就重新离心一瓶，用胰酶消化，弃胰酶后重新培养，就是不见贴壁，状态就一直如刚传代没贴壁样。认为不是污染，可问题会出在哪呢，有虫友了解的，给点解答。谢谢了。
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10楼2010-05-19 16:34:45
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