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1121prettycat

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于MTT法吸光度值偏小已有4人参与

目前正在用MTT法测定细胞存活率,步骤是将培养液吸出后,加入200微升MTT,37°孵育3到4个小时,然后加入150微升DMSO,想问一下大家用的检测波长和参考波长都是多少,我目前用的是490nm的检测波长和650nm的测定波长,现在用490nm得到的吸光度值包括对照都不到0.2,大约在0.17左右,650nm检测得到的数据大约都在0.05或者0.06,不知道吸光度值偏小是因为孵育时间不够还是与细胞有关,因为使用别的细胞的时候吸光度值都没有这么小,想问一下吸光度这么小数据能否使用?
还有数据处理的时候是不是应该用各孔在490nm检测时得到的数值-650nm检测时得到的数值?
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kellysun

金虫 (小有名气)


1121prettycat(金币+1):谢谢参与
请问一下大家加完DMSO后要溶解多久再测OD值的,570 nm的可以吗
8楼2010-01-21 17:23:05
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kellysun

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gaozx123 at 2010-01-22 09:12:26:


加完DMSO后,盖上盖子后,室温下轻微震荡摇晃10分钟就OK了。
吸光值的话,大家都用490nm

呵呵,谢谢啦
13楼2010-01-26 08:32:28
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