24小时热门版块排行榜    

查看: 5606  |  回复: 21
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

1121prettycat

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】关于MTT法吸光度值偏小 已有4人参与

目前正在用MTT法测定细胞存活率,步骤是将培养液吸出后,加入200微升MTT,37°孵育3到4个小时,然后加入150微升DMSO,想问一下大家用的检测波长和参考波长都是多少,我目前用的是490nm的检测波长和650nm的测定波长,现在用490nm得到的吸光度值包括对照都不到0.2,大约在0.17左右,650nm检测得到的数据大约都在0.05或者0.06,不知道吸光度值偏小是因为孵育时间不够还是与细胞有关,因为使用别的细胞的时候吸光度值都没有这么小,想问一下吸光度这么小数据能否使用?
还有数据处理的时候是不是应该用各孔在490nm检测时得到的数值-650nm检测时得到的数值?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kellysun

金虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by gaozx123 at 2010-01-22 09:12:26:


加完DMSO后,盖上盖子后,室温下轻微震荡摇晃10分钟就OK了。
吸光值的话,大家都用490nm

呵呵,谢谢啦
13楼2010-01-26 08:32:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 22 个回答

nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
1121prettycat(金币+1):谢谢参与
1121prettycat(金币+1,VIP+0): 1-8 14:09
1949stone(金币+2,VIP+0): 1-8 18:04
用的细胞数量太少,或者你的细胞特殊,不适合MTT染色。
2楼2010-01-08 11:28:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gaozx123

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
1121prettycat(金币+1):谢谢参与
amisking(金币+3,VIP+0): 1-8 17:28
请问你用的MTT是多大浓度的?怎么加200ul啊。
我用的MTT是2mg/ml的,每孔加50ul,(有的用5mg/ml,每孔加20ul),孵育3h后,加150ulDMSO溶解,用490nm和630nm测吸光值,也就是你说的检测波长与参照波长。
吸光值最好在0.2-0.8范围内,因为这个是最准确的。你测得值小,可能与接种的细胞量有关,还有就是MTT的用量。
数据处理时是需要相减的,即A490-A630。
3楼2010-01-08 11:30:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1121prettycat

木虫 (正式写手)

加的5mg/L的MTT,每孔200微升,用的是原代培养的大鼠小脑颗粒神经元,接种密度7.5万,在培养1d后加药,加药1d和7d后测定
4楼2010-01-08 14:19:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:50 by Z7qfCsdIiD1T
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:39 by Z7qfCsdIiD1T
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 4/200 2026-11-10 19:17 by czAiolzR0IJC
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 3/150 2026-11-10 16:43 by G2rhSvqvhNzl
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 FChKX8meu1ds 2026-11-09 3/150 2026-11-10 16:32 by G2rhSvqvhNzl
[考博] 申请环境,微生物方向博士 +3 浅笑09 2026-11-08 3/150 2026-11-10 12:44 by 可淡不可忘
[考研] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 cqv1zKnzd7hr 2026-11-09 4/200 2026-11-10 11:46 by YHiw1gou1Eda
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”:确已离世,正核实举报内容 +4 yexuqing 2026-11-04 6/300 2026-11-10 11:13 by susizheng
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 4/200 2026-11-10 11:02 by YHiw1gou1Eda
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 0TEMgxdT1eIw 2026-11-09 4/200 2026-11-10 10:51 by YHiw1gou1Eda
[考研] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-08 23:01 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +6 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 12/600 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
请填处理意见