应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 监测分析 » 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？
91/1返回列表
查看: 722  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jiangfan0323

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？

测总糖的标准曲线，用的硫酸—苯酚法，文献中说测量的是光密度，我们只能测吸光度，但吸光度太大，稀释后发现颜色就不对了，本来原液中感觉颜色剃度蛮好的，但稀释后测得的吸光度线性很差。
       我想请问下测定光密度可不可以用吸光度来代替？还有有没有测多糖好的方法?
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-11 08:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢提供方法，能再详细点儿嘛？ 11-11 09:33
我这也用类似方法测carbohydrate,不知道跟你的总糖有啥区别。我这是加1ml of 5% (w/v)phenol solution; 5 ml of concentrated sulfuric acid. standard for 10-20 min, then measure its absorbance at 490 nm.

注意量程， 100 mg/l 左右。

不知是不是跟你咨询的方法类似。
赞一下(7人) 回复此楼
2楼2009-11-11 08:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
是的，和你一样的，我们用葡萄糖做标准物质，放在沸水中保持15分钟
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-11 09:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！这方法我都没用过！受教了！ 11-12 05:57
那你按上面的方法，认真配试剂。Phenol solution 用酒精配，硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围（100mg/l)。样品浓度太高，稀释样品。我前几天还做过，线性很好。跟其它的比色法一样，吸光度在0-1之间最好。
赞一下(8人) 回复此楼
4楼2009-11-11 09:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wxzyfx at 2009-11-11 09:10:
那你按上面的方法，认真配试剂。Phenol solution 用酒精配，硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围（100mg/l)。样品浓度太高，稀释样品。我前几天还做过，线性很好。跟其它的比色法一样，吸光度 ...

我们浓度肯定没有超出范围。现在实验中有几个问题要请教一下：
1，你加浓硫酸之后不要用沸水中保持15min吗？
2、样品你取的是多少毫升？我们加上浓硫酸总共7mL,放在比色皿中，还要进行润洗，就不够了
3、我们测得的吸光度达到0.8多，会不会太大了？
    可以的话，我们加QQ聊吧，我QQ：328011830，谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2009-11-11 09:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！ 11-12 05:58
这是分析方法。 不需要在废水中保持，因为加入硫酸后温度就很高了。
吸光度0.8不是很大。

Carbohydrate concentration
a.        Dilute sample properly if its carbohydrate concentration is higher than 70 mg/L.
b.        Pipette 1 mL of sample to a glass tube.
c.        Add 1 mL of 5% (w/v) phenol solution, mixed.
d.        Quickly add 5 mL of concentrated sulfuric acid.
e.        Mono-, oligo- and polysaccharides are reacted with phenol and concentrated sulfuric acid to form orange color compounds.  Let color developed for about 10-20 minutes and then measure its absorbance at 490 nm against a reagent blank
f.        Calculate sample concentration by comparing its absorbance with standard curve that is made with glucose used as standard carbohydrate
赞一下(7人) 回复此楼
6楼2009-11-11 09:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lk1027

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):鼓励新虫讨论！ 11-12 05:58
当时我测的时候就是测吸光度，也在沸水中放置了15分钟，严格按照标准方法，我觉得主要是当时你做标准曲线时怎样处理，你测定时就怎么处理。如果吸光度太高，可以稀释再测定。
赞一下(7人) 回复此楼
7楼2009-11-12 00:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lk1027 at 2009-11-12 00:25:
当时我测的时候就是测吸光度，也在沸水中放置了15分钟，严格按照标准方法，我觉得主要是当时你做标准曲线时怎样处理，你测定时就怎么处理。如果吸光度太高，可以稀释再测定。

标准曲线我已经做好了，还不错。这个不能稀释的，我一开始做的时候就是稀释的，稀释到了25mL，结果就完全没有线性，感觉就是一加水颜色就变了，不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02，不过线性还很好，我对这个1.02的值很想不通，都超过1了。
赞一下 回复此楼
8楼2009-11-12 09:13:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jiangfan0323 at 2009-11-12 09:13:

标准曲线我已经做好了，还不错。这个不能稀释的，我一开始做的时候就是稀释的，稀释到了25mL，结果就完全没有线性，感觉就是一加水颜色就变了，不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02，不过线性还很 ...

吸光度为1很正常，只要线性好就行。比色法很多的吸光度上限都在1左右，吸光度太小反而误差更大。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-11-12 10:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiangfan0323 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 7/350 2026-10-12 14:47 by chuans0923
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 5/250 2026-10-11 09:00 by 好运来～9527
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
[有机交流] 我应该选哪条合成路线让实验成功率高一些？ +5 jing816y 2026-10-08 9/450 2026-10-10 09:05 by zapen
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭