应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 监测分析 » 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 545  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

jiangfan0323

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？

测总糖的标准曲线，用的硫酸—苯酚法，文献中说测量的是光密度，我们只能测吸光度，但吸光度太大，稀释后发现颜色就不对了，本来原液中感觉颜色剃度蛮好的，但稀释后测得的吸光度线性很差。
       我想请问下测定光密度可不可以用吸光度来代替？还有有没有测多糖好的方法?
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-11-11 08:50:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢提供方法，能再详细点儿嘛？ 11-11 09:33
我这也用类似方法测carbohydrate,不知道跟你的总糖有啥区别。我这是加1ml of 5% (w/v)phenol solution; 5 ml of concentrated sulfuric acid. standard for 10-20 min, then measure its absorbance at 490 nm.

注意量程， 100 mg/l 左右。

不知是不是跟你咨询的方法类似。
赞一下(7人) 回复此楼
2楼2009-11-11 08:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
是的，和你一样的，我们用葡萄糖做标准物质，放在沸水中保持15分钟
赞一下 回复此楼
3楼2009-11-11 09:03:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！这方法我都没用过！受教了！ 11-12 05:57
那你按上面的方法，认真配试剂。Phenol solution 用酒精配，硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围（100mg/l)。样品浓度太高，稀释样品。我前几天还做过，线性很好。跟其它的比色法一样，吸光度在0-1之间最好。
赞一下(8人) 回复此楼
4楼2009-11-11 09:10:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by wxzyfx at 2009-11-11 09:10:
那你按上面的方法，认真配试剂。Phenol solution 用酒精配，硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围（100mg/l)。样品浓度太高，稀释样品。我前几天还做过，线性很好。跟其它的比色法一样，吸光度 ...

我们浓度肯定没有超出范围。现在实验中有几个问题要请教一下：
1，你加浓硫酸之后不要用沸水中保持15min吗？
2、样品你取的是多少毫升？我们加上浓硫酸总共7mL,放在比色皿中，还要进行润洗，就不够了
3、我们测得的吸光度达到0.8多，会不会太大了？
    可以的话，我们加QQ聊吧，我QQ：328011830，谢谢
赞一下 回复此楼
5楼2009-11-11 09:25:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！ 11-12 05:58
这是分析方法。 不需要在废水中保持，因为加入硫酸后温度就很高了。
吸光度0.8不是很大。

Carbohydrate concentration
a.        Dilute sample properly if its carbohydrate concentration is higher than 70 mg/L.
b.        Pipette 1 mL of sample to a glass tube.
c.        Add 1 mL of 5% (w/v) phenol solution, mixed.
d.        Quickly add 5 mL of concentrated sulfuric acid.
e.        Mono-, oligo- and polysaccharides are reacted with phenol and concentrated sulfuric acid to form orange color compounds.  Let color developed for about 10-20 minutes and then measure its absorbance at 490 nm against a reagent blank
f.        Calculate sample concentration by comparing its absorbance with standard curve that is made with glucose used as standard carbohydrate
赞一下(7人) 回复此楼
6楼2009-11-11 09:30:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lk1027

新虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):鼓励新虫讨论！ 11-12 05:58
当时我测的时候就是测吸光度，也在沸水中放置了15分钟，严格按照标准方法，我觉得主要是当时你做标准曲线时怎样处理，你测定时就怎么处理。如果吸光度太高，可以稀释再测定。
赞一下(7人) 回复此楼
7楼2009-11-12 00:25:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiangfan0323

金虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lk1027 at 2009-11-12 00:25:
当时我测的时候就是测吸光度，也在沸水中放置了15分钟，严格按照标准方法，我觉得主要是当时你做标准曲线时怎样处理，你测定时就怎么处理。如果吸光度太高，可以稀释再测定。

标准曲线我已经做好了，还不错。这个不能稀释的，我一开始做的时候就是稀释的，稀释到了25mL，结果就完全没有线性，感觉就是一加水颜色就变了，不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02，不过线性还很好，我对这个1.02的值很想不通，都超过1了。
赞一下 回复此楼
8楼2009-11-12 09:13:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by jiangfan0323 at 2009-11-12 09:13:

标准曲线我已经做好了，还不错。这个不能稀释的，我一开始做的时候就是稀释的，稀释到了25mL，结果就完全没有线性，感觉就是一加水颜色就变了，不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02，不过线性还很 ...

吸光度为1很正常，只要线性好就行。比色法很多的吸光度上限都在1左右，吸光度太小反而误差更大。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2009-11-12 10:11:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiangfan0323 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 理学07化学 303求调剂 +12 睿08 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:36 by Dyhoer
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +12 hanamiko 2026-03-27 12/600 2026-04-01 22:34 by 运气yunqi
[考研] 266求调剂 +7 阳阳哇塞 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:27 by barlinike
[考研] 266分，一志愿电气工程，本科材料，求材料专业调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-04-01 8/400 2026-04-01 21:41 by cal0306
[考研] 314求调剂 +4 溪云珂 2026-03-26 4/200 2026-04-01 17:00 by oooqiao
[考研] 一志愿南昌大学324求调剂 +10 hanamiko 2026-04-01 10/500 2026-04-01 15:14 by Wang200018
[考研] 一志愿：西北大学，英一数一408-284分求调剂 +7 12.27 2026-03-27 7/350 2026-03-31 21:59 by lbsjt
[考研] 材料工程085601数二英一335求调剂 +5 双马尾痞老板2 2026-03-31 5/250 2026-03-31 19:07 by Wang200018
[考研] 346求调剂 一志愿070303有机化学 +11 萝卜炖青菜 2026-03-28 12/600 2026-03-31 17:54 by xhai2011
[考研] 求化学调剂 +12 wulanna 2026-03-28 12/600 2026-03-31 16:38 by 690616278
[考研] 一志愿中海洋材料357 +4 麦恩莉. 2026-03-30 4/200 2026-03-31 14:35 by 记事本2026
[考研] 085600材料与化工调剂 +16 kikiki7 2026-03-30 16/800 2026-03-31 10:03 by 氯化亚硝酰
[考研] 282求调剂 +3 呼吸都是减肥 2026-03-31 3/150 2026-03-31 10:00 by wangjy2002
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
[考研] 085600 286分 材料求调剂 +11 麻辣鱿鱼 2026-03-27 12/600 2026-03-30 19:33 by Wang200018
[考研] 一志愿北京工业大学，324分求调剂 +6 零八# 2026-03-28 6/300 2026-03-29 21:20 by nanaliuyun
[考研] 一志愿双一流机械285分求调剂 +4 幸运的三木 2026-03-29 5/250 2026-03-29 14:49 by Miko19
[考研] 298求调剂 +4 种圣赐 2026-03-28 4/200 2026-03-29 08:42 by q1092522407
[考研] 266求调剂 +11 阳阳哇塞 2026-03-27 12/600 2026-03-27 17:56 by yu221
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭