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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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jiangfan0323

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】测总糖时,光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测?

测总糖的标准曲线,用的硫酸—苯酚法,文献中说测量的是光密度,我们只能测吸光度,但吸光度太大,稀释后发现颜色就不对了,本来原液中感觉颜色剃度蛮好的,但稀释后测得的吸光度线性很差。
       我想请问下测定光密度可不可以用吸光度来代替?还有有没有测多糖好的方法?
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至尊木虫 (正式写手)


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引用回帖:
Originally posted by jiangfan0323 at 2009-11-12 09:13:

标准曲线我已经做好了,还不错。这个不能稀释的,我一开始做的时候就是稀释的,稀释到了25mL,结果就完全没有线性,感觉就是一加水颜色就变了,不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02,不过线性还很 ...

吸光度为1很正常,只要线性好就行。比色法很多的吸光度上限都在1左右,吸光度太小反而误差更大。
9楼2009-11-12 10:11:30
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wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)

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luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢提供方法,能再详细点儿嘛? 11-11 09:33
我这也用类似方法测carbohydrate,不知道跟你的总糖有啥区别。我这是加1ml of 5% (w/v)phenol solution; 5 ml of concentrated sulfuric acid. standard for 10-20 min, then measure its absorbance at 490 nm.

注意量程, 100 mg/l 左右。

不知是不是跟你咨询的方法类似。
2楼2009-11-11 08:57:37
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jiangfan0323

金虫 (小有名气)

是的,和你一样的,我们用葡萄糖做标准物质,放在沸水中保持15分钟
3楼2009-11-11 09:03:48
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至尊木虫 (正式写手)

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luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流!这方法我都没用过!受教了! 11-12 05:57
那你按上面的方法,认真配试剂。Phenol solution 用酒精配,硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围(100mg/l)。样品浓度太高,稀释样品。我前几天还做过,线性很好。跟其它的比色法一样,吸光度在0-1之间最好。
4楼2009-11-11 09:10:35
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