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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 监测分析 » 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？
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jiangfan0323

金虫 (小有名气)

[交流] 【求助】测总糖时，光密度与吸光度可不可以用同一台机器来测？

测总糖的标准曲线，用的硫酸—苯酚法，文献中说测量的是光密度，我们只能测吸光度，但吸光度太大，稀释后发现颜色就不对了，本来原液中感觉颜色剃度蛮好的，但稀释后测得的吸光度线性很差。
       我想请问下测定光密度可不可以用吸光度来代替？还有有没有测多糖好的方法?
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1楼 2009-11-11 08:50:26
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wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
Originally posted by jiangfan0323 at 2009-11-12 09:13:

标准曲线我已经做好了，还不错。这个不能稀释的，我一开始做的时候就是稀释的，稀释到了25mL，结果就完全没有线性，感觉就是一加水颜色就变了，不是那种稀释后的变化。昨天我测得最大吸光度是1.02，不过线性还很 ...

吸光度为1很正常，只要线性好就行。比色法很多的吸光度上限都在1左右，吸光度太小反而误差更大。
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9楼2009-11-12 10:11:30
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wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢提供方法，能再详细点儿嘛？ 11-11 09:33
我这也用类似方法测carbohydrate,不知道跟你的总糖有啥区别。我这是加1ml of 5% (w/v)phenol solution; 5 ml of concentrated sulfuric acid. standard for 10-20 min, then measure its absorbance at 490 nm.

注意量程， 100 mg/l 左右。

不知是不是跟你咨询的方法类似。
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2楼2009-11-11 08:57:37
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jiangfan0323

金虫 (小有名气)
是的，和你一样的，我们用葡萄糖做标准物质，放在沸水中保持15分钟
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3楼2009-11-11 09:03:48
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wxzyfx

至尊木虫 (正式写手)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
luhaitao84(金币+1,VIP+0):谢谢回帖交流！这方法我都没用过！受教了！ 11-12 05:57
那你按上面的方法，认真配试剂。Phenol solution 用酒精配，硫酸就用浓硫酸。另外测量波长是490nm。不要超过浓度范围（100mg/l)。样品浓度太高，稀释样品。我前几天还做过，线性很好。跟其它的比色法一样，吸光度在0-1之间最好。
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4楼2009-11-11 09:10:35
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