| 查看: 3484 | 回复: 15 | |||
zhouzhou_3006木虫 (著名写手)
|
[交流]
做电转感受态时有染菌的吗 已有8人参与
|
||
|
做了一个多月的电转了，丝毫没有一点结果，每次抗性平板上都会长出一些杂菌，空白对照也有杂菌，而且长的速度非常快，涂板不到4 h就能看到菌落，12-24 h基本长满平板，所以就算有阳性克隆子长出来，也被掩盖了，因为那种菌镜检和我的菌很像，根本不好区分。涂双层抗性平板也能生长，现在在找原因，可能的原因有以下几点： 1）感受态细胞在培养过程中染菌，这个已经通过不同抗性的液体培养基同时培养，排除在外了，因为在含抗性的液体培养基中，没有菌生长 2）感受态在制备过程中染菌，这个除离心不在无菌室外，其他步骤都在无菌室完成，离心机没有经过消毒灭菌，不知道这个染菌可能性有多大 3）电转杯没有清洗干净，电转杯在用之前是泡在75%酒精里的，然后用无菌水冲洗几次，放100%乙醇30 min以上，然后在无菌室里吹干（紫外灯开着） 4）电转过程中染菌，以前电转都没有在无菌室操作，后来把电转仪也搬到无菌室了，仍然有染菌现象； 4）制作感受态的无菌水和10%甘油也重新配了，还是染菌。 5）复苏培养2 h的过程是在摇床进行的，1.5 ml的离心管，用封口膜封住，这样会不会染菌？ 能想到的原因就这么多，不知道还有其他的不？有没有类似经历的战友们，是如何对抗染菌这个棘手的问题的？ |
回复此楼» 猜你喜欢
没有任何消息-是不是就凉了
已经有8人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有5人回复
-
人气不行了
已经有10人回复
-
如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》
已经有6人回复
-
我面上完蛋了
已经有10人回复
-
能否退出参与的面上项目解除限项
已经有24人回复
-
filecode，4个jtjc了
已经有17人回复
-
2026国自然函评费到账
已经有19人回复
-
建议基金发布提前给出明确的时间点
已经有16人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 大肠杆菌感受态转化子总是空载体，请高手指点
已经有55人回复
- 大肠杆菌电转感受态细胞的制备中遇到的问题
已经有8人回复
- 一个关于感受态转化效率的问题
已经有11人回复
- 目的片段和T1载体连接后转入感受态细胞涂板子总不长菌……
已经有7人回复
- 急求酿酒酵母的电转感受态制备方法和转化方法
已经有13人回复
- 乳酸菌感受态细胞的制备
已经有6人回复
- 【求助/交流】质粒的转化体积为什么不能超过感受态的十分之一
已经有16人回复
- 【求助/交流】革兰氏阳性菌的感受态细胞制备和转化
已经有9人回复
- 【求助/交流】质粒转化枯草杆菌感受态原理
已经有4人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌感受态制备及转化中的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】请问本身有抗性的菌株制备感受态全程需要加抗性吗
已经有9人回复
quiller2000
木虫 (著名写手)
- 应助: 160 (高中生)
- 贵宾: 0.114
- 金币: 2752.9
- 散金: 50
- 红花: 26
- 帖子: 1168
- 在线: 167.3小时
- 虫号: 895537
- 注册: 2009-11-06
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2009-11-10 21:45:43
2楼2009-11-10 15:46:51
zhouzhou_3006
木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2752.3
- 散金: 1026
- 红花: 6
- 帖子: 1422
- 在线: 956小时
- 虫号: 465454
- 注册: 2007-11-22
3楼2009-11-10 16:55:48
4楼2009-11-10 17:19:29
rosalie161
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1101.9
- 帖子: 438
- 在线: 53.6小时
- 虫号: 482150
- 注册: 2007-12-20
- 性别: GG
- 专业: 植物化学保护
6楼2009-11-11 08:56:25
7楼2010-05-23 17:16:50
zcqcau
铁杆木虫 (著名写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 9904.4
- 散金: 57
- 红花: 2
- 帖子: 1384
- 在线: 40.5小时
- 虫号: 864634
- 注册: 2009-10-07
- 专业: 植物化学保护
8楼2010-05-23 20:25:05
天使托
专家顾问 (职业作家)
T.Shen
-
专家经验: +57 - BioEPI: 17
- 应助: 95 (初中生)
- 贵宾: 0.263
- 金币: 16299.3
- 散金: 593
- 红花: 74
- 沙发: 9
- 帖子: 3659
- 在线: 290.6小时
- 虫号: 441757
- 注册: 2007-10-27
- 专业: 微生物生理与生物化学
- 管辖: 微生物
9楼2010-05-23 21:14:11
nklyw
木虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1772.6
- 散金: 28
- 红花: 1
- 帖子: 645
- 在线: 66.4小时
- 虫号: 843751
- 注册: 2009-09-08
- 专业: 病原细菌与放线菌生物学
10楼2010-05-23 21:50:30
20