应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » IPTG诱导蛋白表达
151/2返回列表12下一页
查看: 6717  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

星星chanyeol

新虫 (初入文坛)

[求助] IPTG诱导蛋白表达 已有8人参与

图片第一条marker 前两条是1mM IPTG 后两条是0.6mM IPTG诱导。pET-28a是我的载体 目的蛋白77KD。就是诱导不出来，之前也用37摄氏度试过也不行 。我都急死了。拜托大虾帮我看看 十分感谢

IPTG诱导蛋白表达


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2017-09-23 15:11:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xl0071334

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-23 20:40:22
不知道各个泳道的样品是什么？如果2和4泳道是全细胞，3和5泳道是空载，那么第二泳道和四泳道比三泳道和5泳道多出来一条带，大小差不多77，应该诱导出来了！

发自小木虫Android客户端
赞一下(3人) 回复此楼
2楼2017-09-23 15:43:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

re-take

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

如果你确定泳道没标错，0.6mM IPTG 是不是有点高了，可以尝试从1mM、0.8、0.6一直到0.1都试一下，然后温度20，18,16度也试一下，我们一般16度诱导过夜。还有你用的表达菌株是啥，实在不行换个载体，或者换真核表达试一试。
赞一下(1人) 回复此楼
船到桥头自然直
6楼2017-09-27 17:04:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Tsingavin

木虫 (小有名气)
空载对照怎么没有跑？
赞一下(1人) 回复此楼
分享是一种快乐
7楼2017-09-30 10:18:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

飘零星lin

金虫 (小有名气)
看起来有有诱岛表达出来。可以试着纯化，或者做个WB鉴定。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2017-10-08 21:39:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarshining

捐助贵宾 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 星星chanyeol at 2017-09-24 13:59:10
2 4是空载，3 5才是我的诱导产物。
...

降低IPTG浓度试试吧，我们一般就用0.25 mM，然后是26度过夜。另外你的蛋白是否是多亚基的，如果多亚基那sds-page看到的大小可能不是77，因为感觉31marker上方很近的地方有浅浅的加深的感觉，建议也加个空载看看更合理。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2017-10-09 13:52:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
12楼2017-11-10 14:13:34
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页
普通回帖

wenyi1991113

铁杆木虫 (正式写手)
看起来是诱导出来了

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
鱼与熊掌不可兼得
3楼2017-09-23 22:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hhz09423

金虫 (正式写手)
纯化下试试

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
4楼2017-09-24 12:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星星chanyeol

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xl0071334 at 2017-09-23 15:43:15
不知道各个泳道的样品是什么？如果2和4泳道是全细胞，3和5泳道是空载，那么第二泳道和四泳道比三泳道和5泳道多出来一条带，大小差不多77，应该诱导出来了！

2 4是空载，3 5才是我的诱导产物。

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
5楼2017-09-24 13:59:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

星星chanyeol

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by Tsingavin at 2017-09-30 10:18:24
空载对照怎么没有跑？

2 4是空载

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
10楼2017-10-09 13:55:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 星星chanyeol 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] filecode +3 cratir 2026-08-14 4/200 2026-08-14 11:47 by 医学老男孩
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +5 工厂打螺丝 2026-08-08 5/250 2026-08-14 11:03 by 玖戈弋
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +5 启萌科技 2026-08-12 13/650 2026-08-14 10:53 by lnjx2024
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +10 Tide man 2026-08-10 11/550 2026-08-14 10:30 by 沁言学术
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +9 majunge000 2026-08-10 12/600 2026-08-13 23:20 by iwuli
[基金申请] 重要来源：本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了，巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 好奇怪的filecode +5 布布和一二 2026-08-08 6/300 2026-08-12 16:11 by 云上清扬
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭