| 查看: 1781 | 回复: 7 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
质粒和片段的融合PCR
|
|||
|
对片段和载体一起设置引物，用的是pet的22，分别进行pcr回收，跑胶。然后用试剂盒进行重组。 但是就是连不上。每次涂平板长出来的菌都是空载。技术反应说是载体在回收的时候把模板也回收进去，这就会长出很多空载。 我是新手，不明白为什么，根据说明书上帝要求，tm值要有60。载体和片段都是按照比例来的。但是为什么就是连不上？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有177人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
-
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 这个烧脑的引物我设计的对吗，请大神指正
已经有0人回复
- 提质粒有两条带，更奇怪的是。。。
已经有1人回复
- 请教大家质粒构建问题
已经有3人回复
- 在做质粒构建实验，用的是SPE1和PST1 2种酶切位点，PRS424-TEF质粒
已经有1人回复
- 如何在丝状真菌中表达如何蛋白
已经有3人回复
- 质粒酶切
已经有3人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 【求助/交流】菌液PCR的经验
已经有6人回复
|
我做的就是无缝克隆。感受态没问题，tm没问题（58和60）。试剂盒本身的模板和载体做了对照 没问题。线性化载体做了感受态，没问题。是不是最大的问题就是目的基因。但是想不出原因？是纯化还是引物设计。 发自小木虫IOS客户端 |
5楼2017-09-19 11:56:50
maoxuequn
2楼2017-09-19 01:30:11
3楼2017-09-19 06:48:47
4楼2017-09-19 10:55:40
