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蜂鸟404铁杆木虫 (正式写手)
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[交流]
这个烧脑的引物我设计的对吗,请大神指正
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| 我手上有一个质粒由于拷贝数比较低所以用酶切连接方法一直连接不上目的片段,现在我想通过PCR的方法直接将我的目的片段融合到质粒上,不知道有没有人这样做过,我从质粒的酶切位点附近设计反向引物,利用反向pcr扩增出线性质粒片段,然后利用目的片段引物与反向引物的重叠区域将目的片段和质粒融合并环化,我的质粒大小5k左右,目的片段1.5k,我取目的片段上首20bp和尾20bp作为重叠区域,我设计的引物如附件中所示,由于这种引物设计有点复杂我怕有错,请大家看看有没有问题,特殊标记的我已经解释代表什么了,希望大家批评指正 |
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本内容由用户自主发布,如果其内容涉及到知识产权问题,其责任在于用户本人,如对版权有异议,请联系邮箱:xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : 质粒片段融合引物设计.docx
2015-09-07 15:56:47, 32.36 K
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