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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 克隆测序结果为什么都是载体呢？
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hanpinxu

新虫 (初入文坛)

[求助] 克隆测序结果为什么都是载体呢？ 已有3人参与

[克隆测序结果为什么都是载体呢？] 我回收的ＤＮＡ片段扩增后条带很亮位置也对，然后做连接和转化，挑取单菌落液体培养，然后用之前扩增目标片段的引物重新扩增菌液，检测后发现也是目标片段，但是测序回来的结果在ｂｌａｓｔ对比都是载体的序列？各位高手请指教
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1楼 2017-09-18 10:17:32
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张林220

木虫 (小有名气)
我也有同样的疑问，已经送样测序3次了，每次都是空载，感觉整个人都不好了

发自小木虫Android客户端
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2楼2017-09-18 10:49:19
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小宝是虫虫

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
提质粒pcr一下，看看是否有条带；感受态是否有问题，一般连接转化不会出现问题的
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.
3楼2017-09-18 10:52:10
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非洲木棉

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
送测之前跑个胶与空载比对一下大小啊
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4楼2017-09-18 13:37:16
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bbass533

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
5楼2017-09-18 14:27:46
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黑胡椒牛排

新虫 (初入文坛)
假阳性吧……是不是空载大小与插入大小差不多

发自小木虫IOS客户端
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2017-09-18 14:53:28
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