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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

[交流] 测序结果看不懂

送菌液测序的,非单克隆是要划菌再调一次单克隆吗?一个方向测序失败是什么意思,什么是无法拼接,这是一个插入了目的基因的载体,egfp.求讲解下是什么意思以及我该怎么做

测序结果看不懂


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aishida

禁虫 (职业作家)

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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:41:28
红木深衣: 金币+5 2017-09-08 16:08:43
本帖内容被屏蔽

2楼2017-09-04 22:57:14
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aishida

禁虫 (职业作家)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:41:49
本帖内容被屏蔽

3楼2017-09-04 22:59:05
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lgd19891003

铁虫 (初入文坛)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:42:03
做完转化需要划单菌落,然后PCR或者酶切验证后再测序,测序失败可能是你基因有啥特殊结构,比如GC含量高等,无法拼接就是因为两端测序未有Overlap部分,所以拼接不了。
不懂就不懂,不能欺人,也不自欺
4楼2017-09-05 09:17:10
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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by aishida at 2017-09-04 22:57:14
非单克隆的意思是你送出的菌落不是单菌落,一个方向测序失败是指一般片段较长的话会从5'3'两个方向分别测序,得到的序列拼接起来就是你的完整序列,拼接失败的原因可能是提取的质粒浓度或质量不好,或者是长度太长超 ...

我是送的菌液测序的,菌液有什么质量好坏之分呢

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5楼2017-09-06 07:12:05
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aishida

禁虫 (职业作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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6楼2017-09-06 07:44:25
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祝福
7楼2017-09-06 08:13:58
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