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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 测序结果看不懂
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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)

[交流] 测序结果看不懂

送菌液测序的，非单克隆是要划菌再调一次单克隆吗？一个方向测序失败是什么意思，什么是无法拼接，这是一个插入了目的基因的载体，egfp.求讲解下是什么意思以及我该怎么做

测序结果看不懂


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1楼 2017-09-04 22:04:19
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aishida

禁虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:41:28
红木深衣: 金币+5 2017-09-08 16:08:43
本帖内容被屏蔽
2楼2017-09-04 22:57:14
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aishida

禁虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:41:49
本帖内容被屏蔽
3楼2017-09-04 22:59:05
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lgd19891003

铁虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-09-06 07:42:03
做完转化需要划单菌落，然后PCR或者酶切验证后再测序，测序失败可能是你基因有啥特殊结构，比如GC含量高等，无法拼接就是因为两端测序未有Overlap部分，所以拼接不了。
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不懂就不懂，不能欺人，也不自欺
4楼2017-09-05 09:17:10
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红木深衣

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by aishida at 2017-09-04 22:57:14
非单克隆的意思是你送出的菌落不是单菌落，一个方向测序失败是指一般片段较长的话会从5'3'两个方向分别测序，得到的序列拼接起来就是你的完整序列，拼接失败的原因可能是提取的质粒浓度或质量不好，或者是长度太长超 ...

我是送的菌液测序的，菌液有什么质量好坏之分呢

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5楼2017-09-06 07:12:05
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aishida

禁虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
本帖内容被屏蔽
6楼2017-09-06 07:44:25
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gengxin60
祝福
7楼2017-09-06 08:13:58
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