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测序结果怎么看对不对啊 已有7人参与
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小弟导师做生物化学的，然后需要用几个真核蛋白，于是就转到大肠杆菌里，不表达。 导师说基因是人家处理过的，公司处理的可以在原核表达，公司怎么处理我就不知道了。 于是我就送去测了个序，公司说只有正向成功了，反向不成功，要单向测，我也不懂，就说好。 于是想先把送回来这个正向的看看。在线做的ncbi blast和开放阅读框不太明白。 不明白的是 1.这个开放阅读框最大的也才80个氨基酸，那应该是不太对把，比对结果是与mrna相似，应该是去掉内含子的，那怎么这样？ 2，每个阅读框的起始为什么不是甲硫氨酸？起始是怎么算的？ 3.blast比对结果具体怎么看，貌似相似度挺高的，有没有可能是一两个基因不对，就不表达？ 会不会是测序问题，等单向测序出来了可能就不是这个结果了  搜狗截图20150921172104.png  搜狗截图20150921172121.png  搜狗截图20150921185622.png |
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3楼2015-09-22 00:11:16
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mRNA中的CDS序列，就是从ATG开始到终止密码子中间的序列，不一定核苷酸序列完全一致，只要氨基酸序列没有改变就好，如果你需要改变氨基酸序列，需要做点突变才行 发自小木虫Android客户端 |
28楼2015-09-23 06:33:36
halfbeer
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29楼2015-09-23 08:31:12
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4楼2015-09-22 00:13:46
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最后一个是提取的纯度，我觉得你们老师能做到这一步，蛋白质纯度应该是问题没问题的把(?????)っ。。。外加说一句学长或者学姐我只是猜想，有什么不对的还请见谅 发自小木虫Android客户端 |
6楼2015-09-22 00:17:56
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我这个蛋白绝对有几百个氨基酸，八十怎么可能正常？细菌内没有去除内含子的机智，阅读况中间的是内含子吗？可是又与mrna序列比对相似，所以是不是啊，好奇怪 发自小木虫Android客户端 |
7楼2015-09-22 08:13:25
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